油橄榄果渣多酚提取实验方案详解.docVIP

油橄榄果渣多酚提取实验方案 油橄榄果渣预处理 （一）油橄榄果渣的脱油 1．有机溶剂浸提法1.1原料、仪器及试剂 原料：油橄榄鲜果渣，用前在-20℃冰箱封存。 仪器：BS210S 型电子分析天平，DHZ -C 型大容量恒温振荡器，N -1001 型旋转蒸发仪。 试剂：正己烷为分析纯试剂; 实验用水为去离子水。 1.2实验步骤 准确称取10 g 粉碎后的油橄榄果渣，置于250mL具塞三角瓶中，按1:的料液比加入溶剂; 将三角瓶置于℃（50℃）的恒温振荡器中振荡提取，转速0 r /min（150 r /min），时间为h; 用过滤法分离溶剂混合物与残渣，用一定量溶剂洗涤残渣2 次，收集脱油油橄榄果渣，干燥至恒重40℃，12h），计算脱油率。2.酶法（酶法辅助提取工艺对橄榄油品质的影响） 2.1原料、仪器及试剂 原料：油橄榄鲜果渣，用前在-20℃冰箱封存。 仪器：BS210S 型电子分析天平，DHZ -C 型大容量恒温振荡器，N -1001 型旋转蒸发仪、磁力搅拌器（可加热）。 试剂：纤维素酶; 实验用水为去离子水。 2.2实验步骤 准确称取10 g 粉碎后的油橄榄果渣，置于250 ml具塞三角瓶中，加入1.0%( W/W) 的纤维素酶水溶液10 ml，置于50℃的恒温振荡器中振荡提取，转速150 r /min，时间为45min，4 000 r /min 离心20 min，去上层油脂，收集下层脱油的果渣，干燥至恒重40℃，12h），计算脱油率。 （二）油橄榄果渣的干燥 1.油橄榄果渣的冷冻干燥 1.1 原料、仪器及试剂 原料：用上述油橄榄脱油果渣，用前在-20℃冰箱封存。 仪器：BS210S 型电子分析天平，冷冻干燥机。 1.2 实验步骤 将原料果渣放入冷冻干燥机，冷冻干燥预冷冻时间为24h，在干燥时间分别为12、24、36、48h的条件下对样品进行冷冻干燥处理，对所得样品进行粉碎，选过80目筛的样品进行多酚提取操作，以多酚得率为指标确定最适宜干燥时间。 2.油橄榄果渣的真空干燥 2.1 原料、仪器及试剂 原料：油橄榄脱油果渣，用前在-20℃冰箱封存。 仪器：BS210S 型电子分析天平，真空干燥机。 2.2 实验步骤 2.2.1 干燥温度对油橄榄果渣得率的影响 将原料果渣放入真空干燥机，分别在温度为30、40、50、60℃条件下对样品进行真空干燥处理，然后对所得样品进行粉碎，选过80目筛的样品进行多酚提取操作，以多酚得率为指标确定最适宜真空干燥温度。 2.2.2 干燥时间对油橄榄果渣得率的影响 将原料果渣放入真空干燥机，在温度为40℃，干燥时间分别为6、12、18、24h条件下对样品进行真空干燥处理，然后对所得样品进行粉碎，选过80目筛的样品进行多酚提取操作，以多酚得率为指标确定最适宜真空干燥时间。 3.油橄榄果渣干燥工艺的确定 根据以上实验结果，选择最佳干燥方式和条件，作为油橄榄果渣干燥工艺。 （三）油橄榄果渣的粉碎 1.原料、仪器及试剂 原料：用上述干燥后油橄榄果渣，用前在-20℃冰箱封存。 仪器：BS210S 型电子分析天平，超微粉碎仪，分样筛（60、80、100、120目）。 2．实验步骤 将原料果渣放入超微粉碎仪中粉碎一定时间后取出，分别用60、80、100、120目的分样筛对样品进行筛分，制得不同粒度的果渣样品，对这些果渣样品进行多酚提取操作℃，2h），以多酚得率为指标确定最适宜的样品粒度。 油橄榄多酚的提取 溶剂法提取油橄榄多酚 1.实验材料、仪器及试剂 材料：经上述预处理的油橄榄果渣，用前在-20℃冰箱封存。 仪器：UV—754紫外可见分光光度计(上海分析仪器总厂)，ZFQ—85A旋转蒸发器(上海医械专机厂)，电子天平，高速离心机，100ml容量瓶（磨口）及配套的冷凝管，橡胶管，温度计、水浴锅、移液管（5ml、10ml、25ml）、洗耳球、容量瓶（100ml）、酒精比重计。 试剂：乙醇（分析纯）、丙酮（分析纯）、蒸馏水。 2.乙醇浸提法提取油橄榄多酚 2.1 试验方法 2.1.1 单因素实验 (1)浸提温度比较试验 精确称取1.0 g干燥橄榄粉末4份，分别加入70％乙醇30 mL，分别在3、50、70、9℃（20、35、50、65℃）下浸提2 h，提取2次，离心，收集上清液，定容到100mL。 (2)乙醇浓度比较试验 精确称取1.0 g干燥橄榄粉末4份，分别加入30％、50％、70％、90％乙醇30 mL，50℃下浸提2 h，提取2次，离心，收集上清液，定容到100mL。 (3)料液比比较试验 精确称取1.0 g干燥橄榄粉末4份，分别加入50％乙醇10、20、30、40 mL，50℃下浸提2h，提取2次，离心，收集上清液，定容到100mL。 (4)浸提时间比较试验 精确称取1.0 g干燥橄榄粉