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_动物细胞融合与单克隆抗体的制备案例.ppt

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(三)动物细胞融合的应用 二、单克隆抗体 如何大量生产单克隆抗体? 下图为某同学根据杂交瘤技术的方法,设计的生产破伤风杆菌的实验方案 3、图中B为________过程,常用_________作为诱导剂,该细胞继承___________的遗传特性,既能__________,又能___________。 1、该实验方案的目的是__________ 2、A是从小鼠的脾脏中取得_______,该细胞能够产生______ 4、C过程指细胞培养,该过程包括_____培养和_____培养两个阶段,其中_____代以内的的细胞属于细胞株。 制备单克隆抗体 B细胞 抗体 细胞融合 灭活病毒 双亲细胞 分泌抗体 无限增殖 原代 传代 50 B 体外培养 骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞 足够数量的细胞群 注射到 小鼠腹腔 A C 1、动物细胞融合和植物原生质体融合比较, 在动物细胞融合中有特殊性的是( ) A、融合的原理 B、融合的优点 C、融合的诱导手段 D、融合的过程 2、动物细胞融合的目的中最重要的是( ) A、克服远缘杂交不亲和 B、制备单克隆抗体 C、培育新物种 D、生产杂种细胞 3、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合, 得到杂交细胞,经培养可产生大量的单克隆抗 体,与骨髓瘤细胞融合的是( ) A、经过免疫的B淋巴细胞 B、不经过免疫的T淋巴细胞 C、经过免疫的T淋巴细胞 D、不经过免疫的B淋巴细胞 * 一、动物细胞融合 有些细胞的融合是正常的生命活动。如精子与卵细胞的结合。 两个细胞正在融合 受精作用 (一)概念 动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多 个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 (二)动物细胞融合的过程 与植物原生质体融合原理相同,方法类似。 杂交细胞:融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞。 一、动物细胞融合 ? ? ? ? 再分化 ? 植物细胞杂交技术利用什么原理? 用什么方法可以诱导植物细胞融合? 一、原理: 细胞膜具有流动性 细胞的全能性 二、诱导方法:离心 振动 电激 、聚乙二醇 植物细胞杂交技术有什么用途? 三、用途: 获得杂种植株 脱分化 动物细胞A 动物细胞B 杂种细胞 动物细胞融合 ⑴.原理: 1、动物细胞融合的基本原理是什么? 2、动物细胞融合的诱导方式是什么?与植物细胞融合的诱导方式有什么不同? 与植物原生质体融合的基本原理相同,即细胞膜的流动性。 ⑵.诱导方式: 物理法: 电激、振动、离心 化学法: 聚乙二醇(PEG) 生物法: 灭活的病毒 例如:仙台病毒 用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程 细胞核 病毒颗粒 细胞核 灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面 细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接 细胞融合,形成杂交细胞 (细胞膜具有一定的流动性) 1.概念: 2.结果: 3.原理: 4.诱导方式 指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程(细胞杂交)。 形成单核的杂交细胞 细胞膜的流动性 物理法:离心、振动、电激 化学法:聚乙二醇(PEG) 生物法:灭活的病毒 动物细胞融合 植物细胞杂交与动物细胞融合的比较 主要用途 诱导方法 使用的酶 细胞融合原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 纤维素酶、果胶酶 胰蛋白酶 物理(离心、振荡、 电刺激) 化学(聚乙二醇) 物理、化学方法 (同左) 灭活的病毒 获得杂种植株 制备单克隆抗体 1.突破有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。 2.成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。 鼠—鸡、鼠—兔、鼠—猴、人—鼠、人—兔、 人—鸡、人—蛙、酵母菌—鸡 、人—胡萝卜等 3、重要用途:制备单克隆抗体。 (一)、什么是抗体? 抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 三、单克隆抗体 1、抗体是由何种细胞产生的? 浆细胞(效应B细胞) 2、抗体是如何产生的? B淋巴细胞 抗原 增殖分化成浆细胞 3、一种B淋巴细胞能产生几种抗体? 一种 (二)获得抗体的传统方法 1、把某种抗原反复注射到动物体内,然后从动物血清中分离出所需的抗体。 2、缺点: 产量低,纯度低,特异性差。 人们发现,在动物发生免疫反应的过程中,体内的B淋巴细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体,但是每一个B细胞只分泌一种特异性抗体。要想获得大量的单一抗体,必须克隆单一的B淋巴细胞,形成细胞群。 1、请从以上文字资料中找出单克隆抗体的概念 用单个B淋巴细胞进行(无性繁殖)克隆,得到的基因型相同的细胞群能够分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体,这种抗体就叫做单克隆抗体。 1

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