提醒 ⑴第一步和第二步需要限制酶,且要求用同一种,目的是产生相同的黏性末端。 ⑵第二步中有二种工具酶并用到了运载体,故是基因工程中最核心的一步。 ⑶对基因操作是否成功不但要在分子水平上鉴定还要在个体水平上鉴定。 ⑷目的基因指要表达的基因,标记基因指运载体上且用于鉴定筛选的基因。 ⑸目的基因表达的标志:通过转录、翻译产生相应的蛋白质。 2.(2010·浙江卷,2)在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中,下列操作错误的是 ( ) A.用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸 B.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和运载体 C.将重组DNA分子导入烟草原生质体 D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞 对位训练 答案 A 解析 构建重组DNA分子时,需用同种限制性核酸内切酶切割目的基因和运载体,再用DNA连接酶连接形成重组DNA分子,而烟草花叶病毒的遗传物质是RNA,所以A项错误。重组DNA分子形成后要导入受体细胞(若是植物细胞,则可导入其原生质体),若导入的受体细胞是体细胞,经组织培养可获得转基因植物。目的基因为抗除草剂基因,所以未成功导入目的基因的细胞不具有抗除草剂的能力,可用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞。 作物育种方式包括杂交、诱变、单倍体育种、
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