2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体(公开课)讲义.pptVIP

精讲精练系列 人教版选修三 2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体 植物细胞A 植物细胞B 去掉细胞壁 去掉细胞壁 原生质体A 原生质体B 原生质体融合 杂合的原生质体 再生出细胞壁 杂种细胞 细胞分裂 分化发育 愈伤组织 杂种植株 温故知新: 植物体细胞杂交过程 材料: 1970年，有两位科学家做了一个人—鼠细胞融合的实验。那么，如何实现人—鼠细胞的融合，动物细胞融合后还有什么用途呢？ (一)动物细胞融合的概念 动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 （二）动物细胞融合的过程 与植物原生质体融合原理相同，方法类似。 杂交细胞:融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞。 一、动物细胞融合 (三)动物细胞融合的意义 1.突破有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。 2.成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。 3.为制造单克隆抗体开辟了新途径。 鼠—鸡、鼠—兔、鼠—猴、人—鼠、人—兔、 人—鸡、人—蛙、酵母菌—鸡 、人—胡萝卜等 二、单克隆抗体 1.什么是抗体？ 抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 B淋巴细胞（浆细胞）能产生抗体。 2.抗体由哪种细胞产生的？ 3.获得抗体的传统方法 把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需的抗体。 缺点： 产量低，纯度低，特异性差。 人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B淋巴细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每一个B细胞只分泌一种特异性抗体。要想获得大量的单一抗体，必须克隆单一的B淋巴细胞，形成细胞群。 4.请从以上文字资料中找出单克隆抗体的概念 用单个B淋巴细胞进行克隆，得到的细胞群能够分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体，这种抗体就叫做单克隆抗体。 5.如何才能大量生产单克隆抗体？ 提示1：仅用细胞培养技术可行吗？ 提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？ 提示3：有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢？ B淋巴细胞 注射特定抗原蛋白 骨髓瘤细胞 培养骨髓瘤细胞 融合 多种杂交细胞 在具有筛选作用的培养基上培养 专一抗体检验阳性 克隆上述杂交细胞 单克隆抗体的制备过程 分开不同杂交细胞，克隆专一抗体， 检验阳性细胞 专一抗体检验阳性 单克隆抗体 注射到小鼠体内 体外培养 单克隆抗体 思考以下问题： 1、如何获得相应的B淋巴细胞？两两融合细胞有几种类型？ 2、本过程中进行了两次筛选，目的分别是什么？ 3、杂交瘤细胞有何特点？ 4、如何培养杂交瘤细胞并提取单克隆抗体？ 三、单克隆抗体的应用 与常规抗体相比，单克隆抗体特异性强，灵敏度高，并可大量制备。 应用主要有： 1、作为诊断试剂 2、用于治疗疾病和运载药物 准确、高效、简易、快速 把抗癌细胞的单克隆抗体与药物相结合，制成“生物导弹”。 思考与探究 1.植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术有什么不同？ 植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术基本相同，不同的是植物体细胞融合前需去掉细胞壁，然后再融合；动物细胞融合是两个体细胞直接融合。 诱导融合方法不同：动物细胞诱导融合所用的方法比植物体细胞杂交多一类灭活的病毒诱导；结果不同：植物体细胞杂交培养成了杂种植株，而动物细胞融合只培养出了杂交细胞。 1．在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（　　） A．结果是相同的 B．杂种细胞的形成过程基本相同 C．操作过程中酶的作用相同 D．诱导融合的手段相同 Ｂ 练习 2. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ） ①淋巴细胞　 ②小鼠骨髓瘤细胞　 ③B淋巴细胞自身融合细胞　 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞　 ⑤杂交瘤细胞 A． ②④ B．①③⑤　　 C． ①②③④ 　 D．②③ C 精讲精练系列