生化试验设计教案分析.ppt

生化设计实验 设计实验人员： 赵乐，王康华，王凯，孔景浩,许瑶，王轩，王硕 实验原理——血红蛋白概况 血红蛋白是红细胞的主要成分，在正常情况下，每个红细胞均含有一定量的血红蛋白。血红蛋白是由珠蛋白和亚铁血红素组成的结合蛋白质。血红蛋白除能与氧结合形成氧合血红蛋白外，还能与某些物质作用形成多种血红蛋白衍生物。它们具有特定的色泽和吸光谱，在临床上，可用以诊断某些变性血红蛋白血症和血红蛋白的定量测定。 实验原理——基本原理 根据蛋白质各种特性的差异，如蛋白质的理化性质、形状、大小、电荷性质和多少、吸附性质、亲和力、溶解度等等，可以用来分离不同种类的蛋白质 实验步骤——样品处理 b、血红蛋白的释放：加蒸馏水到原血液体积，再加40%体积的甲苯，置于磁力搅拌器上充分搅拌10分钟。 实验步骤——样品处理 c、离心：将搅拌好的混合液转移到离心管内，以2000r/min的速度离心10分钟，试管中的溶液会分为四层：最上层为无色透明的甲苯层；中上层为白色薄层固体的脂溶性物质的沉淀层；中下层为红色透明的血红蛋白的水溶液层；最下层为暗红色其他杂质的沉淀层。 实验步骤——样品处理 d、分离血红蛋白溶液：用滤纸过滤，除去脂溶性沉淀层，在分液漏斗中静置片刻后，分离出下层红色透明液体。 粗分离 取1ml的血红蛋白溶液装入透析袋中，将透析袋放入盛有300ml的物质的量浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液中，