第2节基因工程及其应用概论.ppt

基因工程操作的工具 将目的基因片断从人体细胞内提取， 需要基因的剪刀——限制性内切酶。 将目的基因与运载体DNA连接， 需要基因的针线——DNA连接酶。 将目的基因运入大肠杆菌， 需要基因的运输工具——运载体。 限制性内切酶 分布：主要在微生物中。 特点：专一性和特异性，即识别特定核苷酸序列，切割特定切点。 结果：产生黏性未端（碱基互补配对）。 举例：大肠杆菌的一种限制酶（EcoRⅠ）能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切割点上将DNA 分子切断。目前已发现的限制酶有200多种。 限制性内切酶（EcoRⅠ）作用过程 点击播放 DNA连接酶 连接酶的作用：将互补配对的两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子。 ？ 基因进行了切割以后就有了切口， 怎样才能将有切口的基因与其他基因缝合在一起呢？ DNA连接酶的作用过程 点击播放 C T T A A G A A T T C G 重组DNA分子 （外源基因） ？如何将外源基因送入受体细胞呢？ 注：限制酶与连接酶作用的位点都是 磷酸二酯键 运载体 作用：将外源基因送入受体细胞。 种类：质粒、噬菌体和动植物病毒。 能将外源基因送入细胞的工具就是运载体。 大肠杆菌 DNA 质粒 （环状DNA分子）