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发酵工程复习
1、发酵流程
2、微生物代谢产物的分类
初级代谢产物:是与菌体生长相伴随的产物,主要是构成细胞高分子物质(蛋白质、核酸、多糖、脂类、维生素)的单体物质。
次级代谢产物:是以初级代谢产物、中心代谢产物等,如氨基酸、有机酸等为原料而进行合成,与生长不相伴随,生物功能不明确,其合成常因环境条件稍为变动而中止,结构起比初级代谢产物复杂,如抗生素、毒素、植物碱、胞外多糖等。
转化产物:转化产物的底物不是微生物细胞的产物,而是外源物质,微生物仅在其分子上加工,如加入羟基,还原双键,脱氧或切断支链。
第二章
4菌种分离 1.分离思路 2.培养分离原则 3.分离步骤与筛选步骤 4. 生产选种
5
营养缺陷型菌株:微生物经过诱变剂处理后产生的一种生化突变体,由于基因突变,它失去了合成某种物质(如氨基酸、维生素或核苷酸碱基)的能力,在基本培养基上不能生长,大多数营养缺陷型菌株需要补加一定种类的有机物之后才能生长。
4.1 随机筛选
随即筛选即菌种经诱变处理后,进行平板分离,随机挑选菌落,从中筛选出高产菌株。主要有摇瓶筛选法、 琼脂块筛选法、自动化筛选和筛选工具微型化。
4.2 理性化筛选
由于诱变后出现正突变株的几率小,用随机筛选的方法要耗费大量的人力物力,因而筛选方法逐渐转向理性化筛选。
理性化筛选:运用遗传学、生物化学的原理,根据产物已知的或可能的生物合成途径、代谢调控机制和产物分子结构来进行设计和采用的一些筛选方法,以打破微生物原有的代谢调控机制,获得能大量形成产物的高突变菌株。
主要方法是根据菌株的初级和次级代谢产物,使用不同的选择性培养基来筛选高产菌株。
3、代谢育种的方式:
(1)组成型突变株的选育
(2)抗分解调节突变株的选育
(3)抗反馈调节突变株的选育
(4)细胞膜透性突变株的选育
5、菌种的保藏
第四初级代谢 是为生物提供能量、合成中间体及其关键大分子,如蛋白质、核酸等的各种相互关联的代谢网络酶活性的调节类型 (1) 酶活性的激活 (2) 酶活性的抑制 诱导物可以是基质、基质的衍生物不被代谢, 称为安慰诱导物)或者是中间产物,酶也可诱导自身的合成。诱导的实质是开启酶合成相关基因的表达。
铵阻遏
氮分解产物的调节作用指的是被菌体迅速利用的氮源(特别是铵)能阻抑某些参与含氮化合物代谢的酶的合成。如铵盐或其代谢产物对微生物的代谢能产生“铵阻遏”效应。在初级代谢中,它能阻遏许多芽孢杆菌的蛋白酶的合成。通常受到NH4+阻遏的酶有:亚硝酸还原酶、硝酸还原酶、固氮酶、乙酰胺酶、脲酶、黄嘌呤脱氢酶、组氨酸酶、天冬酰胺酶、脯氨酸氧化酶、尿素和谷氨酸渗透酶等。
6 代谢调控在发酵工业中的应用
应用营养缺陷型菌株以解除正常的反馈调节
应用抗反馈调节的突变株解除反馈调节
控制细胞膜的渗透性
7, :1 2 代谢的阻遏和诱导 3合适的C,N比 100∶0.2~2.0 4 pH的要求
影响培养基质量的因素 1原料及设备的预处理 2原材料的质量 3发酵特性的影响
4灭菌 5其它影响因素(水质和粘度)
第六章
第七章
连续加压灭菌法优点
①因采用高温瞬时灭菌,故既可杀灭微生物,又可最大限度减少营养成分的破坏,从而提高了原料的利用率,比“实罐灭菌”(120℃,30分钟)提高产量5~10%;
②由于总的灭菌时间较分批灭菌注明显减少,所以缩短了发酵罐的占用周期,从而提高了它的利用率;
③由于蒸汽负荷均匀,故提高了锅炉的利用率;
④适宜于自动化操作;
⑤降低了操作人员的劳动强度。
3、
表面消毒剂:是指对一切活细胞都有毒性,不能用作活细胞内的化学治疗用的化学药剂。
石炭酸系数:指在一定时间内被试药剂能杀死全部供试菌的最高稀释度与达到同效的石炭酸的最高稀释度的比率。一般规定处理时间为10分钟,而供试菌定为Salmonellatyphi(伤寒沙门氏菌)。
灭菌原理:利用空气压缩时所产生的热量进行灭菌。
第八章
温度的影响及其控制
温度对生长的影响
不同微生物的生长对温度的要求不同,大致可分为四类:嗜冷菌适应于0~26 ℃生长,嗜温菌适应于15~43 ℃生长,嗜热菌适应于37~65 ℃生长,嗜高温菌适应65 ℃以上生长
微生物药品发酵所用的菌体绝大多数是中温菌,如霉菌、放线菌和一般细菌。它们的最适生长温度一般在20~40℃
温度对发酵的影响
温度影响反应速率
b. 温度影响发酵方向
c. 影响发酵液的粘度
2 发酵热
所谓发酵热就是发酵过程中释放出来的净热量。
在发酵过程中产生菌分解基质产生热量,机械搅拌产生热量,而罐壁散热、水分蒸发、空气排气带走热量。这各种产生的热量和各种散失的热量的代数和就叫做净热量。
发酵热是引起发酵过程温度变化的原因。发酵热大,温度上升快,发酵热小,温度上升慢。
Cm——水的比
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