复习问题 为什么要进行细胞固定化? 细胞固定化相对固定化酶有什么优缺点及其应用领域? 第五节 固定化酶和固定化细胞的表征 评价固定化酶(细胞)的指标 固定化酶(细胞)的活力测定:应注明反应温度、pH、底物外,还应流注明搅拌速度、搅拌时间、测定系统类型 活力单位定义及表示方法:μmol.min-1.mg-1; 或μmol.min-1.cm-1(酶板、酶管、酶膜) 固定化酶活力的测定方法与游离酶不同,要做适当的改进之后才能用于固定化酶的测定;目前有二种基本的测定系统:填充床和均匀悬浮保温系统. 第五节 固定化酶和固定化细胞的表征 测定方法分为间歇测定和连续测定两种: 间歇测定:在搅拌或振荡反应器中,间隔一定时间取样,过滤后按常规进行测定.此法简单,但受反应器形状、大小及反应液量影响,必须固定条件下测定;尽可能在达到最高反应速度的振荡或搅拌条件下进行。 连续测定:固定化酶装入具有恒温水夹套的柱中,以不同流速流过底物,测定酶柱流出液,根据流速与酶活力的关系算出酶活力。测定条件要尽量与工程条件相同。 第五节 固定化酶和固定化细胞的表征 2.偶联率及相对活力的测定: 活力回收:指固定化后固定化酶(或细胞)所显示的活力占被固定的等当量游离酶(细胞)总活力的百分比.即:固定化酶总活力/加入酶总活力*100% 偶联率:载体上固定的蛋白量占加入蛋白总量的百分比(加入蛋白活力-上清液蛋白活力)/加入
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