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生长植株的检查 将种子培育成植株,然后检查其病症,这是测定样品中是否存在细菌、真菌或病毒 等最切实可行的方法。可从供检的样品中 取得接种体,以供对健康幼苗或植株一部 分进行感染试验。严格各种条件,必须防 止植株从别处来的次生感染。 一、种子健康测定的检验方法 2、真菌检测方法 吸水纸法 吸水纸法适用于许多类型种子的种传真菌病害的检验,尤其是对于许多半知菌,有利于分生孢子的形成和致病真菌在幼苗上的症状的发展。为了促进孢子形成,建议在培养期间给以12小时黑暗与12小时近紫外光(NUV)的交替处理。建议光源使用“黑光”荧光灯(峰值为360nm),不过日光荧光灯管效果也不错。 一、种子健康测定的检验方法 琼脂皿法 主要用于发育较慢的致病真菌潜伏在种子内部的病原菌,也可用于检验种子外表的病原菌。 发芽法 可以通过发芽法比较未处理种子的病原体作用和影响。 一、种子健康测定的检验方法 二、细菌测定方法 1、生长植株鉴定 最简单的方法是种植有种传细菌的种子,鉴定幼苗的症状。 2、检验室方法 检验室测定细菌的方法程序: ①病原体提取。提取方法主要有通过浸泡种子,或通过磨碎或破碎种子并在液体中浸湿等两种方法。种子数量和方法应根据试验确定; ②分离。通过琼脂皿可以将病原细菌从提取后的溶液中分离出来,将提取液原液或者稀释液涂在琼脂皿上,可分生出单个或者许多菌落; ③细菌鉴定。细菌检测可用下列方法:生物化学检测法;血清检测;噬菌体检测;致病体检测;核酸杂交探针法。 按照ISTA和GB/T3543规程,随即从送验样品中数取400粒种子,鉴定时需设重复,每个重复不超过100粒种子。根据种子的形态特征,逐粒观察,必须备有标准样品或鉴定图片和有关资料。 三、病毒测定方法 (一)测定方法 四、结果表示与报告 以供检样品感染种子数的百分率或样品重量中病原体的数目表示结果。 把结果填报在种子检验报告“其他项目测定”栏目内,要写明病原菌的拉丁学名。填报结果必须同时说明所用的测定方法,包括所用的预措方法和用于检验的样品或部分样品的数量。 课堂小结 转基因种子特征特性测定 测定的重要性 测定的目的 检测方法 种子健康测定 健康测定的方法 细菌测定方法 病毒测定方法 结果表示与报告 农作物种子检验员专业知识试卷(室内检验员) 模拟试题讲解: * * 第十七章 转基因种子特定特性测定 随着生物技术产品(转基因品种)的问世,植物转基因品种鉴定问题日益突出。植物转基因品种的不断育成和商业化应用,在种子质量检测中出现了新的挑战。这就是植物转基因品种种子的鉴定问题。 一、植物转基因品种鉴定的重要性 二、转基因种子特定特性测定的目的 一是检测(Detection),确定种子批中是否含有GMOs ; 二是鉴定(Identification),如果检测的结果是阳性的,需要通过鉴定知道GMOs是否是经授权的,如果未经授权,种子批将被拒绝。如果是经授权,则进一步定量分析; 三是定量(Quantification),即通过定量分析,确定种子批中的GMO是否超过极限值。 二、转基因种子特定特性测定的目的 关于极限值,欧盟2003年规定常规种子批中含有外来GMO的最大界限值是:甜油菜(sweet rape)0.3%,番茄、甜菜、棉花、菊苣、玉米和马铃薯0.5%,大豆0.7%,其它未经权威机构批准的基因为0.0%。当超过极限值时,种子批应标注出含有“ %GMO”。 二、转基因种子特定特性测定的目的 什么是GMOs 是指凭借现代生物技术获得的遗传材料新异组成的活生物体。实际上就是将外源DNA导入生物体基因组,引起了遗传改变,改变了遗传组成的生物,就是转基因生物。 三、检测方法 (一)国际规程对转基因种子检验方法采用一种全新的规定 国际种子检验协会(ISTA)对于转基因检测方法的规定采用了一种全新的方法,这种方法称为“以性能为基础检测方法”。以性能为基础的检测方法意味着检验室可以研发和(或)使用一种在国际种子检验规程中还未公布的方法。 并且一旦当检验室通过性能数据正式认可该方法后,就可以申请国际种子检验协会授权使用该检测方法。 三、检测方法 (二)主要检测方法 生物表现型检测方法 特异蛋白质检测方法:包括酶联免疫检测和横向侧流条测定; DNA检测方法:包括PCR定性和定量分析 第十八章 种子健康测定 第十八章 种子健康测定 第一节 概述 一、种子健康测定的目的 1、有关定义 种子健康测定:测定种子是否携带有病原菌(如真菌、细菌及病毒
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