HD-2柱 HZ-803柱 007X7柱 提取工艺条件的设计 树脂 类型 形式 交联度 pH 料液 浓度 洗脱条件 强酸 阳树脂 盐型 H型pH↓ 用大网格树脂 分子量大 Co↓ Z1Z2 稀溶液 不必稀释 氨水 pHpK3 使α物↓ 不用有机溶剂 不用强碱 弱酸 阳树脂 pK5.7 盐型 α树↑ 同上 5.7pH7.5 α树↑α物↑ 同上 同上 不能用HCl 4.5pH7.5 稳定性 α物↑ 离子交换提取蛋白质 传统离子交换剂不适用于提取蛋白质 (1) 交联度大 (大分子不能进入) (2) 电荷密度高(结合太强) (3) 骨架憎水性强(蛋白质易变性) 要求:良好的亲水性、具有较大的均匀网格结构、粒度越小分辨率越高 骨架种类: 离子交换纤维素 交联葡聚糖 交联琼脂糖 聚乙烯醇类 亲水性树脂离子交换剂功能团 阴离子交换树脂 阳离子交换树脂 蛋白质的离子交换交换容量 亲水性离子交换容量不能达到无机离子交换容量 (1)蛋白质不能进入活性中心 (2) 一个蛋白质与多个功能基发生作用 吸附机理 (1)静电吸力 (2)憎水 (3)氢键 (4)被吸附蛋白表面进一步吸附 离子交换提取蛋白质 离子交换提取蛋白质 蛋白质离子交换分离的基本步骤 平衡 上样吸附 洗脱 再生 + + + + + + - - - - - - - anion exchange bead Equilibration 蛋白质离子交换基本步骤 Sample application and wash - - - - - - - - - - - + + + + + + - - - - 蛋白质离子交换基本步骤 Elution - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - + + + + + + + + + + + + - - 蛋白质离子交换基本步骤 Regeneration - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - + + + + + + 蛋白质离子交换基本步骤 Sample application and wash Elution Equilibration Regeneration - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + - - - - - - - - - - - 蛋白质离子交换基本步骤 软水和无盐水的制备 水处理中的几个基本概念 1.软化水:将水中硬度(钙、镁离子)去除或降低到一定程度的水,水在软化过程中,仅硬度降低而总含盐量不变。 2.脱盐水:指水中盐类(主要是溶于水的强电解质)除去或降低到一定程度的水,其电导率为1.0—10.0 μs /cm 电阻率1万-100万欧·厘米,含盐量小于1-5毫克/升。 3.纯水:是指水中的强电解质和弱电解质(如SIO2,CO2等)去出或降低到一定程度的水.电导率为1.0—0.1 μs/cm;电阻率100万-1000万欧·厘米,含盐量小于1毫克/升。 4.超纯水:水中的导电介质几乎完全去除,同时不离解的气体,胶体以及有机物质(细菌等)也去除至很低程度的水。其电导率为0.1—0.055 μs电阻率大于1000万 ,含盐量小于0.1毫克/升.理想纯水(理论上)电导率为0.05 μs,电阻率为18.3兆欧·厘米。 水溶液的电导率(25℃) 30%H2SO4 1Ω·cm 106 μs/cm 海水 33 33×103 天然水 20×103 50 普通蒸馏水 1000×103 1 超纯蒸馏水 10×106 0.1 华震去离子水 20~100×104 5~1 电导率 电阻率 软水的制备 树脂: 阳树脂(强酸性) 阴树脂(强碱或弱碱,弱碱不能除去弱酸性阴离子硅酸,碳酸) 串联床 : 强酸-弱碱; 强酸-强碱-弱酸
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