外周血DNA的提取汇编.ppt

外周血中DNA的提取与鉴定 实验目的 掌握人全血DNA提取的原理和操作步骤。 了解DNA基本理化性质。 3. 初步了解DNA琼脂糖电泳鉴定的方法。 实验原理 1 保证DNA一级结构的完整性； 2 其他生物分子如蛋白质、多糖和脂类等分子的污染应尽量降低到最低； 3 尽量去除对后续分子实验有抑制作用的有机溶剂和重金属离子； 4 其他核酸分子RNA，应根据实际需要处理。 实验原理 理论上所有真核细胞、原核细胞、病毒等都可以提取DNA。 样本选择取决于实验目的。 全血是基因组提取中最常见的样本之一。 理化性质 核酸是由碱基、戊糖及磷酸组成的生物大分子，分为脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）两类。 1. 酸碱性 核酸分子中有酸性的磷酸基和碱性的含氮碱基，属于两性化合物，但是磷酸基的酸性较强，所以核酸总体上表现为酸性，带负电荷。 2. 溶解度与粘度 核酸是极性化合物，微溶于水，其钠易盐溶于水，而不溶于乙醇、苯酚、氯仿、乙醚等有机溶剂。 核酸是高分子化合物，粘度很大。 3. 紫外吸收 核酸有强烈的紫外吸收，其最大吸收峰在260nm处，常以A260表示。 实验原理 生物的大部分或几乎全部的DNA都集中在细胞核或核质体中，人与动物的DNA主要存在于细胞核中，并与蛋白质结合的构成大小不一的染色体。所以蛋白质是DNA提取过程中常见的污染之一，而且蛋白质污染常常影响到以