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图10-2大肠杆菌拟核的电子显微镜图，显示释放出的染色体DNA及数个质粒DNA 图10-24 大肠杆菌的环状连锁图。图距用min表示，总长100 min Hayes（1952)试验证明，在接合过程中遗传物质的交换是一种单向的转移： 供体(雄性)→ 受体(雌性) 1、F因子 Hayes和Cavalli-Sforza（1953)发现，供体有一个性因子即致育因子--F因子 ，由DNA组成， 是染色体外的 遗传物质。其 组成： E.coliF因子存在状态有3种类型： ①没有F因子，即F– ②自主状态的F因子，即F+ ③整合的F因子，即Hfr 2、接合过程 F+×F- ↓ F+ → F+ F- → F+ F因子偶然地(10000个F+细胞中有1个)能整合到细菌染色体中去，就可能引起染色体的转移 5’ 图 10－16 两个E.Coli 细胞杂交的电子显微镜照片 (X 34,300) 性伞毛/接合管 Hfr×F- ↓ Hfr → Hfr F- → F- 接合开始，F因子仅有一部分进入F–细胞，剩下部分基因只有等到细菌染色体全部进入到F–细胞之后才能进入，然而转移过程常常中断 5’ 受体细胞常常只接受部分的供体染色体，这些染色体称为供体外基因子，受体的完整染色体称为 受体内基因 子，这样的 细菌称为部 分二倍体或 部分合子、 半合子 3、中断杂交试验及染色体作图 为了证明接合时遗传物质从供体到受体细胞的转移是直线式进行的，1957年Wollman和Jacob设计了一个著名的中断杂交试验 ? Hfr:thr+leu+lac+gal+azistonsstrs F- : thr-leu-lac-gal-aziRtonRstrR ? 每隔一定时间取样，放在食物搅拌器内搅拌 ? 培养在含str的完全培养基上， Hfr被杀死 ? 用影印培养法测试形成的F-菌落的基因型， 确定每个基因转入F-的顺序（时间） ? 根据基因转入F-的时间，进行细菌染色体作图 ? ? ? ? ? ? 图10－19 中断杂交后，重组体中Hfr遗传性状出现的频率 9 11 18 25 图 10-20 沃尔曼和雅各布的中断杂交试验 表示Hfr菌株的基因是以直线方式进入F–细胞的 thr leu azi ton lac ga F O 8 8.5 9 11 18 25 min 根据中断杂交实验作出的大肠杆菌连锁图 用不同的Hfr菌株进行中断杂交实验，基因转移的原点(O)和转移的方向不同，说明F因子和细菌染色体都是环状的 Hfr的 类型 基 因 转 移 顺 序 HfrH 1 2 3 AB312 0 thr pro lac pur gal his gly thi 0 thr thi gly his gal pur lac pro 0 pro thr thi gly his gal pur lac 0 pur lac pro thr thi gly his gal 0 thi thr pro lac pur gal his gly 表 10－6 用中断杂交法确定的几个Hfr菌株的基因顺序 如果两个基因间的转移时间小于2 min，用中断杂交法所得的图距不太可靠，应采用传统的重组作图法。 lac+ade+ 基本培养基 lac+ ade– lac–ade–