遗传学诊断.pptVIP

* 遗传学之产前诊断 总体设计思路： 由于王某怀孕7周，在8~12周以内，并且已知可代遗传病 地中海贫血。该疾病为16号染色体上的基因的缺失α或突变引起。因此采用绒毛吸取术，α获得胎儿的滋养层细胞，经短期培养后，提取DNA做基因分析，利用PCR-RFLP进行基因分析，判断出王某的胎儿是否是HbH患者。 具体设计方案： 1 实验目的： 对胚胎或胎儿在出生前是否患有某种遗传病或先天畸形作出准确的诊断。从而为遗传病风险家族提供充足可靠的信息，使他们在妊娠期做出适当选择。从提高家庭生活质量，节约金钱，减少群体中基因频率，提高人口素质。 2 实验原理： 利用DNA的半保留复制及电离时不同质量的基因所移动的距离不同。 3 实验材料、试剂及器材 材料：胎儿的绒毛滋养层细胞 试剂：BamHI酶、对DNA培养的相关试剂 器材: B超机、吸取绒毛的注射器、电泳池 4 实验方法及注意事项 方法步骤 在B超的严密监视下，用取样器由腹部进入，在子宫壁的胎盘绒毛叶处抽取5~10㎝绒毛枝。经处理，进行短期培养，提取细胞中的DNA 利用PCR对待定的DNA片段进行扩增 变性 在高温（90℃～96℃）使双链DNA解旋。 退火 在较低温度下使引物与靶DNA互补结合。 延伸 在中间温度（70℃～75℃）和TaP酶作用下，沿模板从引物端端延伸使DNA延长 再利用BamHI酶解后，使DNA为一定长度，再进 行电泳染色，依DNA长度不同而显示不同位置的条带 记录实验结果，进行遗传指导 C. D. ②注意事项 充分的掌握相关的临床资料。如家族史、遗传病遗传基础。 在取材时，应注意严格消毒，以防感染，使孕妇与胎儿发生危险。 在取材时，应在B超的严密监视下，以取得所需要的组织，同时以防伤及胎儿而导致流产。 在实验时，要注意是否有“假嵌合体” 出现。若有，应再次取材，重新签定，以确保实验准确。 在PCR技术中，选择温度要慎重。 5 实验结果及遗传指导 － － － － － 10kb 14kb 18kb － aA aA ① aA a0 ② aA a+ ③ a+ a0 ④ * * * ααα