山东大学细胞15第十五章预案.ppt

第十五章 细胞基因表达和蛋白质的生物合成 第六节 蛋白质的细胞定位  一、蛋白质合成后的去向和命运 （一）蛋白质合成后的去向 蛋白质的转运据核糖体位置分两大类： 翻译后转运（post-translational translocation):胞质内游离核糖体合成的蛋白质，合成后释放出来，再转运。 共翻译转运 (Co-translation translocation)：粗面内质网上的核糖体合成的蛋白质，边合成边转运。 1、游离核糖体上合成的蛋白质： （1）非定位性的细胞质溶质蛋白； （2）定位性的细胞质溶质蛋白； （3）核定位蛋白； （4）半自主性细胞器的组成蛋白。 2、粗面内质网上核糖体合成的蛋白： （1）向细胞外的分泌蛋白； （2）溶酶体酶； （3）插入到内质网膜中的蛋白，进入内膜系统和质膜。 （二）蛋白运送的机制 分拣信号（sorting signal）、蛋白质分拣 具分拣信号的蛋白有3种不同的基本转运途径： （1）孔门运输（穿核孔运输） （2）跨膜运输：通过膜上的蛋白转移器，被运蛋白必须是非折叠状态的蛋白。 （3）膜泡运输：可溶性的分泌蛋白 上述三种运输均需消耗能量。 二、蛋白质运输的信号理论 （一）信号学说 1971年Blobel等提出有关分泌蛋白合成机制的信号假说 1975年破译了第一个信号肽序列 20世纪80年代初发现了信号识别颗粒及其受体 （1）信号序列、信号肽(signal peptide)，10-30个疏水氨基酸（mRNA带信号序列）； 蛋白质翻译耦联易位系统： （2）信号识别颗粒（SRP） 11S核蛋白：6条肽链+1分子7S RNA （3）SRP受体(DP) 停泊蛋白（rER膜整和蛋白） 核糖体A位——SRP——DP是插入在内质网膜上的一种停泊蛋白，对7SRNA有识别能力。 信号假说要点： 信号密码子 信号肽（疏水氨基酸，穿膜信号） 信号识别颗粒（SRP）可识别信号肽 核糖体A位 RER膜上有SRP受体；信号肽入腔，为信号肽酶切除 RER膜上有核糖体亲和蛋白，可与核糖体结合 （二）指导蛋白质定位转运的信号序列 ①信号序列（signal sequence）：存在于蛋白质一级结构上的线性序列，通常15-60个氨基酸残基，有些在完成蛋白质的定向转移后被信号肽酶（signal peptidase）切除；通常信号序列对所引导的蛋白质没有特异性要求，每一种信号序列决定特殊的蛋白质转运方向。 ②信号斑（signal patch）：存在于完成折叠的蛋白质中，构成信号斑的信号序列之间可以不相邻，折叠在一起构成蛋白质分选的信号。 signal sequence and signal patch 三?、分子伴侣在蛋白折叠和转运中作用 分子伴侣（molecular chaperone) ：在蛋白质折叠和组装过程中，分子伴侣能够防止多肽链链内和链间的错误折叠或聚集作用，并且还可以破坏多肽链中已形成的错误结构，但其自身并不参加最终产物的组成。 （一）分子伴侣的类别 1、热休克蛋白家族的几种蛋白：Hsp70，Hsp60 ，Hsp90 等(heat shock protein)，为主要的分子伴侣类的蛋白；热休克蛋白的功能。p474 2、钙连接蛋白：即钙结合蛋白。 （二）分子伴侣的基本结构和作用机制 1．Hsp70分子伴侣系统： 分子伴侣—chaperone N端：ATPase功能域 C端：底物结合域、可变动功能域 ATP结合态，能与底物结合 ADP结合态 Hsp70的功能：防止蛋白质聚集，协助折叠错误的蛋白质重新折叠。 2．Hsp60分子伴侣系统 ColEL——伴侣蛋白 chaperonin ColES—— 辅伴侣蛋白 ColEL 结构 14 个亚基组成两个方向相反的环 中央空腔为“ 矫型中心” （三）分子伴侣在蛋白定位和跨膜运转中的作用 1．游离核糖体上合成的蛋白去向 留在细胞质、运到其它细胞器。未折叠或部分折叠构象 2．Hsp70 和Hsp60相互配合对新生蛋白质进行正确加工折叠 图14-74 3. 分子伴侣在蛋白质跨膜运转中的作用 例子，Hsp70在蛋白质向线粒体中输入的作用。图14-75 四、内质网途径的蛋白合成及其命运 （一）内质网上核糖体合成的蛋白质及其特点 跨膜蛋白和可溶性蛋白，后者进入内置网腔 共同特点：信号肽；翻译和转移同步进行（共翻译转移方式） （二）可溶性蛋白的合成与转移 分泌到细胞外的蛋白质 图14-76、14-77 （三）膜整合蛋白的定位机制 1．具有单一跨膜片段的跨膜蛋白质定位 信号肽启动转移，停止转