层析工艺设计以及优化1详解.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * 确定蛋白质的变性温度 差热扫描分析（DSC）是常用的确定变性温度的一种方法。在DSC中蛋白质的变性是一个吸热的峰，而蛋白质的聚集是一个放热的峰。一些因素可以影响测定。首先就是所采用的方法,不同的测定方法对于相同的蛋白可以给出不同的值。最近红外光谱（IR）和毛细管电泳（CE）技术也有在确定变性温度中的应用。 吸附状态下蛋白质结构的检测 纳米颗粒 圆二色光谱 需要大量的重复实验取平均，文献中报道为32-128次 吸附状态下蛋白质结构的检测 平面 表面等离子体共振——测量反射光 石英微天平——晶体压电效应测量表面质量变化 双偏振极化干涉——测量干涉条纹，信息全 原子力显微镜——隧道效应 吸附状态下蛋白质结构的检测 介质颗粒 荧光 H-D交换结合核磁共振 H-D交换结合质谱 共聚焦拉曼光谱 仪器检测部分小结 注意事项 越灵敏的仪器影响因素越多——如原子力显微镜 多种手段互相验证，不仅检测不同级别的结构，二级结构也通常用红外和圆二色相互验证 对仪器不恰当的使用以及对原理的忽视往往带来很多错误的结果 目前的科研原来越依赖于先进的仪器，但人和思想是最重要的 * * * * * * * * * * * * * * * * * In any chromatographic step there are four main