ln-蛋白质的修饰与讲解.pptVIP

磷酸化 脂基化 甲基化 乙酰化 糖基化 SUMO化 巴豆酰化 一、磷酸化 磷酸化 去磷酸化 催化磷酸化的蛋白激酶 蛋白质丝氨酸/苏氨酸激酶 PKA PKC PKG 蛋白质酪氨酸激酶 PTK 非受体型Src 受体型EGFR IGFR PDGFR 双专一性蛋白激酶 DSPK Weel ERK1 EKR2 催化蛋白质去磷酸化的蛋白磷酸酶 蛋白质丝氨酸/苏氨酸磷酸酶 PP1、PP2A、PP2B、 PP2C 蛋白质酪氨酸磷酸酶 1/3是跨膜的，类似受体 2/3是游离于胞质，为非受体型 二、脂基化 为长脂肪链通过O或者S原子与蛋白质缀合的过程，通常是蛋白质分子的半胱氨酸残基被棕榈酰化或者法呢基化。 铜蓝蛋白 Leu-Ala-Gly-Cys 分别催化的酶是棕榈酰基转移酶 法呢基转移酶 三、甲基化 S-腺苷甲硫氨酸提供甲基集团 甲基转移酶 组蛋白 Lys Arg 四、 乙酰化 乙酰基 乙酰基转移酶 主要Lys 组蛋白的乙酰化调控基因转录 调控自噬 调节代谢酶的活性 五、类泛素化--SUMO化 small ubiquitin related modifier 小泛素相关修饰物，分子结构类似泛素 E1活化酶、E2结合酶、E3连接酶 SUMO的C-端Gly残基和底物蛋白Lys的-氨基间形成一个异肽键 SUMO的C-末端短肽切除，暴露出Gly-Gly模特序列，使其变成成熟的功能蛋白 去SUMO化 Ulp SUMO化修饰的生物学作用 底物多为转录调节因子或共调节因子 参与维持基因组的完整性及调节染色体的凝集与分离 参与DNA修复 拮抗泛素作用 调节蛋白的核质转运和信号转导 六、巴豆酰化 巴豆酰基 巴豆酰基转移酶 组蛋白Lys 基因活化 七、不同翻译后修饰相互协调与影响 细胞信号转导过程中存在多种蛋白翻译后修饰 一种蛋白质可以有一种以上的翻译后修饰 八、研究策略 放射性跟踪 修饰性抗体技术 质谱技术 第二节 蛋白质的降解 一、UPS （ubiquitin-proteasome system） 组成 20S核心颗粒 蛋白酶体激活因子 19S、11S、PA200 分类 ATP和泛素依赖的UPS-19S 不依赖ATP和泛素的UPS-11S 带有成串泛素分子的底物蛋白再被26S蛋白酶复合体识别 蛋白酶复合体分子量极其巨大 在蛋白酶复合体腔中，蛋白质被水解 稳定残基:半胱、丙、丝、苏、甘、缬、蛋 肽链内部的保守序列：PEST使蛋白质分子短命----UPS 识别信号 去泛素化酶（deubiquitinating enzyme，DUB） 二、自噬溶酶体系统 自噬体系和蛋白酶体系 自噬与UPS之间在功能上有重叠---错误折叠蛋白HSP70介导的自噬，HSP70底物可被泛素化 错误折叠蛋白的聚集体被巨自噬降解 神经元蛋白-α突触核蛋白 自噬与UPS相互影响 End Atg9是迄今发现的唯一一个编码跨膜蛋白的Atg基因, 能通过影响膜泡运输对自噬发生起调控作用。营养物质缺乏 时, Atg9与Atg23、 Atg27结合, 将它们运 输至PAS; Atg9/mAtg9 在Atg5-Atg12-Atg16连接系统中, 首先由Atg7 E1 活化Atg12; 然后将Atg12传递给类Atg10（E2）最后, Atg12被传递到Atg5, 与Atg5的Lys共价结合形成Atg12-Atg5复合物。自噬发生时, Atg16和Atg12-Atg5结合，Atg16含有一个螺旋卷曲结构易于形成低聚物, 使得其能把更多的Atg12-Atg5连接起来形成巨大复合物。从而可能为参与自噬泡形成的蛋白质提供相互作用的平台。自噬发生时, 此复合物定位于隔离膜上, 参与 LC3-II的形成过程, 从而促进自噬泡膜的延长。 自噬发生过程中有两组类泛素化修饰过程, 分别发生在Atg5-Atg12-Atg16连接系统和Atg8/LC3连接系统中, 用于隔离膜的延长和自噬泡的形成。 Atg5-Atg12-Atg16复合物 Atg8/LC3 LC3：是酵母Atg8分子在哺乳动物中的同源物，是自噬发生的一个标志蛋白。 功能：促进自噬泡膜的延长和融合, 是自噬泡形成所必需的。 LC3合成后, 最初以pro-LC3形式存在, 然后立刻被Atg4B切割形成LC3-I。自噬发生时, 均匀分布于细胞质中的LC3-I被Atg7（E1）活化并与其形成硫酯键, 然后被传递给Atg3（E2）, 并最终在Atg5-Atg12-Atg16复合物（E3）的帮助下连接上一个PE分子, 形成具有膜结合能力的LC3-II。Atg16L的细胞定位决定了LC3成熟的位置, 并促进LC3-II结合到自噬泡上。 自噬小泡的成核需要含有ATG6 其哺乳动物同源蛋白命名为Becli