PCR技术及其应用考试试卷2014年.doc

《PCR技术及其应用》课程考试试卷 （硕士研究生） 班级： 硕士12班 学号： 20141100043 姓名 戴鹏辉 得分 ： 一、下页试题为单项选择题，请将每题的正确答案填在试卷首页的答题栏内（共50题，每题1.8分，总分90分） 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 答案 题号 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 答案 题号 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 答案 题号 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 答案 二、简述RACE的原理和技术(10分) 1、PCR反应的五个要素是：（ ） ①引物 ②dNTP ③ Mg离子 ④ 模板 ⑤水 ⑥ TaqDNA聚合酶　⑦水 请选择 A、①②③④⑤ B、①②③④⑥ C、②③④⑤⑥ D、①③⑤⑥⑦ 2、PCR产物鉴定常用的方法是：（ ） A、凝胶电泳法 B、杂交法 C、免疫法 3、PCR反应中随着复性温度升高，扩增的特异性：（ ） 升高 下降 不变 4、原位PCR技术中对组织和细胞进行固定的目的是：（ ） 维持细胞形态 创造一个既便于试剂进入细胞，又能减少产物渗出的内环境 防止操作中的细胞移动 5、增效PCR包括（ ）轮PCR扩增 A、1 B、2 C、3 D、越多越好 6、增效PCR第一轮扩增的目的是（ ） ①增加引物量 ②增加模板量 ③延长作用时间，降低聚合酶作用速度，以提高忠实性 ④阻止过多引物间的作用的二聚体的形成，提高特异性 A、①③ B、②④ C、①②③ D、④ 7、增效PCR第二轮扩增的目的是（ ） ①增加模板量 ②提高特异性 ③延长非特异性条带 ④增加特异靶序列产量 A、①③ B、②④ C、①②③ D、④ 8增效PCR第一轮扩增时要求引物的量比通常其它PCR方法（ ） 高 一样 低 无所谓 9增效PCR反应总的循环次数比其它PCR方法多的原因是（ ） 为了得到更大量的产物 为了提高特异性 为了提高敏感性 虽然引物总量未变，但由于分两次加入，使每次反应浓度降低了，为了得到相同的扩增产物必须增加循环次数 10、膜结合PCR之所以可以对很少的模板或污染比较严重的样品进行扩增，其主要依据是： 模板与膜固定后可以作彻底漂洗 模板与膜结合后可以提高PCR扩增效率 模板与膜结合后，可用不同引物先后对不同区段进入扩增 薄膜可以吸附其它杂质从而消除污染物的影响提高信噪比 11、对模板进行固定以前首先应使样品变性，其原因是：（ ） 为PCR反应作准备 使样品中的杂质变性后除去 薄膜结合单链DNA的能力强 提高Taq聚合酶的活力 12、膜结合PCR的扩增效率比液相扩增法为：（ ） 低 高 相同 不一定 13、膜结合PCR必须（ 0 适当减少循环次数 适当减少引物用量 适当延长延伸反应时间 适当增加循环次数 14、膜结合PCR不能减轻下列（ ）样品的污染： 蛋白质和肽类 核酸 脂类物质 小分子代谢产物 15、反向PCR扩增到的序列与通常PCR的差别在于：（ 0 反向PCR扩增的是已知序列之间的未知，而通常PCR反应扩增的是已知序列两侧的已知序列。 反向PCR扩增的是已知序列两侧的未知序列，而通常PCR反应扩增的是已知序列之间的序列。 反向PCR扩增的是未知序列两侧的已知序列，而通常PCR扩增的是已知序列两侧的已知序列。 反向PCR扩增的是已知序列，而常规PCR扩增的是未知序列。 16、反向PCR之所以能扩增未知序列的原因在于：（ ） 通过限制性酶切然后环化改变了序列的拓扑关系 通过控制反应条件改变了聚合酶的聚合方向 通过限制性酶切然后环化，改变了序列的内外关系 设计的特殊引物改变了延伸反应方向 17、反向PCR中为何要将环化的DNA分子切成结状（ ） 环状双链DNA分子易于形成超螺旋结构不利于进行PCR反应 DNA聚合酶不能有效结合环状分子 环状双链分子使扩增的非特异性太强 环状双链无法解链，也就无法与引物结合 18、将环状DNA分子切成线性分子时要求限制性内切酶位点位于：（ ） 已知序列外侧 未知序列内侧 已知序列内侧 不易判断 19、可在成环的DNA分子中引入切割的方法有：（ ） ①煮沸法 ②限制性酶切法 ③EDTA-寡核苷酸介导的特异裂解法 ④机械剪切法 A、①③ B、②④ C、①②③ D、④ 20、重组