17药物敏感性试验标准操作规程.docVIP

目的 规范药物敏感性试验标准操作程序，确保药敏结果准确。 原理 将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种待检菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后会不断地向纸片周围区域扩散，形成递减的梯度浓度，在纸片周围抑菌浓度范围内待检菌的生长被抑制，从而产生透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映检测菌对测定药物的敏感程度，并与该药对待检菌的最低抑菌浓度（MIC 呈负相关，即抑菌圈愈大，MIC愈小。 试剂 M-H培养基、无菌生理盐水、药敏纸片、无菌棉签、35 ℃孵育箱、标准比浊管或比浊仪。 质控 常用细菌药敏质控标准菌株参见CLSI规定。 质控菌株每日随临床标本一起进行药敏试验，测定质控菌株的抑菌环。质控菌株的抑菌环在允许范围之内，说明结果可信。 质控的频率 由于纸片法药敏试验是很稳定的，在不失控的时候，可以每周作1~2次质控菌株的测定。如果发现有失控的情况，就必须每日作1次，寻找失控的原因并予以纠正。如果连续30日失控＜3次的，可以恢复每周1次。 操作步骤 挑取4~5个纯培养菌落，接种于3~5 ml M-H肉汤（0.5麦氏单位）中，经35℃培养6~8h。 用无菌生理盐水或M-H肉汤校正菌液浊度，使其与标准比浊管的浓度相同。 用无菌棉拭蘸取校正过的菌液，在试管壁上挤压几次，压去多余的菌液，涂布整个M-H平板表面，再重复两次，每次旋转平板60°，使整个平板涂布均匀，最后用棉拭涂布平板四周边缘一