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人脐血干细胞分化为鼻黏膜纤毛上皮细胞 董金辉，任秀敏，徐 鸥，王建星(河北医科大学第二医院耳鼻喉科，河北省石家庄市 050000) 引用本文：董金辉，任秀敏，徐鸥，王建星. 人脐血干细胞分化为鼻黏膜纤毛上皮细胞[J].中国组织工程研究，2016，20(32):4764-4770. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.32.008 ORCID: 0000-0002-7736-0966(董金辉) 文章快速阅读： 文题释义： 脐血干细胞：其具备自我更新和增殖的能力，并能在特定因素的影响或诱导下，向各种细胞或组织分化。同时，脐血具有淋巴细胞抗原性弱、功能相对不成熟、移植后发生移植物抗宿主病的风险较低等特点，并且来源广，不受伦理和道德的限制，因此是干细胞移植的重要来源之一，具有广泛应用于临床组织工程学的巨大潜能。 鼻黏膜纤毛上皮细胞：其与外界环境想通，属于不稳定细胞，受损后导致鼻黏膜生物功能严重创伤。临床上常采用鼻内窥镜手术进行长期、定时随访观察鼻腔内容物，防止鼻腔黏膜粘连和炎症复发。术后使用黏液促排剂及其他局部生物材料来改善鼻黏膜的修复，但是由于随访时间不易控，时间长达数月也不能完全治愈，不但给患者带来了沉重的经济负担，而且也严重影响了患者的生活质量。 摘要 背景：鼻黏膜纤毛上皮细胞受损后导致鼻黏膜生物功能严重创伤。相对于其他成体干细胞，人脐血干细胞具有更好的诱导分化潜能。 目的：观察人脐血干细胞通过体外培养、诱导分化为鼻黏膜纤毛上皮细胞的可行性。 方法：收集正常健康人脐血，分离人脐血干细胞，通过体外培养，鉴定干细胞表面标记物后进行传代培养；取第3代脐血干细胞，用携带增强型绿色荧光蛋白重组腺相关病毒进行感染，采用气液界面培养法，分别于诱导感染1，2周后对干细胞进行MUC8基因PCR检测。在脐血干细胞培养3周后进行FOXJ1免疫荧光染色。 结果与结论：①培养鉴定结果：原代人脐血干细胞传代至第3代时，细胞形态较均一，折光性良好，可表达干细胞表面标记物；②转染鉴定结果：细胞转染3 h后，可见第3代干细胞呈现出绿色荧光，培养48 h后，流式细胞仪检测细胞阳性率达96.2%，说明干细胞转染效果很好；③RT-PCR检测：人脐血干细胞MUC8 mRNA无表达，而鼻黏膜上皮细胞MUC8 mRNA呈现出强表达，培养1周时 MUC8 mRNA呈现弱表达，培养2周后有一定的增强；④免疫荧光染色：在转染的绿色荧光蛋白背景下可观测到FOXJ1红色荧光呈现阳性表达结果；⑤结果说明：人脐血干细胞在适宜培养条件下可分化为鼻黏膜纤毛上皮细胞。 关键词： 干细胞；脐带脐血干细胞；鼻黏膜上皮细胞；人脐血干细胞；气液界面培养法；分化；鼻黏膜纤毛上皮细胞； MUC8；FOXJ1；鼻窦炎 主题词： 干细胞；组织工程；鼻窦炎 基金资助： 2014年度河北省医学科学研究重点课题计划(Z Human umbilical cord blood stem cells differentiate into nasal ciliated epithelial cells Dong Jin-hui, Ren Xiu-min, Xu Ou, Wang Jian-xing (Department of Otolaryngology, Second Hospital of Hebei Medical University, Shijiazhuang 050000, Hebei Province, China) Abstract BACKGROUND: Damage to nasal ciliated epithelial cells can lead to a severe injury in nasal biological function. Compared with other adult stem cells, human umbilical cord blood stem cells have better differentiation potential. OBJECTIVE: To explore the feasibility of human umbilical cord blood stem cells differentiating into nasal ciliated epithelial cells through in vitro culture and induction techniques. METHODS: Normal and healthy umbilical cord blood samples were collected