家禽大肠杆菌和沙门氏菌分离及药敏试验.doc

家禽大肠杆菌和沙门氏菌分离及药敏试验方法 鸡大肠杆菌病主要依靠药物防治，但药物的大量使用带来了大肠杆菌多重耐药性和药物残留等诸多问题。目前世界许多地方开展了调查研究 试验材料 病料来源。养殖户送检样本有典型大肠杆菌和沙门氏菌病变的病死鸡，孵化后期死亡鸡胚（没有出壳鸡苗）作病料。 毛蛋没有出壳小鸡 小鸡卵黄囊 青年鸡病料 2.细菌分离用的培养基：麦康凯培养基、普通培养基、SS培养基 、亚硫酸铋培养基等 二、试验方法 1.大肠杆菌的分离培养。无菌采取死鸡的肝、孵化后期死胚卵黄囊（没有出壳鸡苗）在麦康凯平板上分区划线37℃培养12~24小时，在麦康凯培养基上生长出边缘整齐稍凸起、表面光滑湿润、直径1～2毫米的红色圆形菌落，革兰氏阴性，接种到SS培养基37℃培养12~24小时，生长出粉红菌落。亚硫酸铋琼脂大肠杆菌不生长。 2.沙门氏菌分离培养。 无菌采取死鸡的肝、孵化后期死胚卵黄囊在在麦康凯平板上分区划线37℃培养12~24小时，然后挑取麦康凯琼脂平板上淡黄色半透明单个菌落，接种到SS培养基37℃培养12~24小时，生长出黄色半透明或黑色菌落。亚硫酸铋 琼脂沙门氏菌生长绿色单个菌落。 如图： SS培养基沙门氏 亚硫酸铋琼脂 沙门氏菌 麦康凯培养基大肠杆菌 SS培养基大肠杆菌和沙门氏菌 普通培养基大肠杆菌和沙门氏菌 药敏试验 分离到的大肠杆菌和沙门氏菌混合在一起，涂匀营养培养基，选用的药敏片做好标号，平整贴在培养基上37℃培养12~24小时，观察细菌抑菌圈大小，选抑菌圈越大药物敏感度越高，使用疗效越好。同时考虑某些药物肠道不吸收问题。 四．药敏分析及预防： 该地区的大肠杆菌和沙门氏菌对粘杆菌素、痢菌净、氟苯尼考、硫酸阿米卡星、头孢噻呋、硫酸新霉素较敏感。合理搭配抗生素使用减少细菌耐药性的产生，临床上长期大量使用不规范抗菌药物，致使大肠杆菌沙门氏菌耐药菌株不断产生，敏感的药物越来越少，也可以据本场的大肠杆菌和沙门氏菌血清型做疫苗预防。这提示我们每隔一定时间要对本地区的大肠杆菌耐药性进行检测，以便更好地选择敏感有效的药物，以控制该病的流行。 科学合理控制家禽大肠杆菌和沙门氏菌病，抗菌药物和大肠杆菌沙门氏菌疫苗的使用仍然是有效控制家禽大肠杆菌和沙门氏菌病的手段之一，孵化厂的污染会导致雏鸡早期感染大肠杆菌或沙门氏菌病。孵化厂的污染主要是指种蛋在孵化后期和出雏期在孵化箱内、出雏箱内的污染，患病的雏鸡和被污染的蛋壳以及器具等，都可能使新生雏鸡受到感染。针对这种情况，根据笔者多年来的经验，可在雏鸡出壳24小时之内进行高敏药物或大肠杆菌沙门氏菌疫苗配合颈部皮下注射，在生产中常用头孢噻呋钠能有效控制雏鸡早期大肠杆菌或沙门氏菌病的发生。