无菌检验方法适用性试验方案.doc

无菌检验方法适用性试验方案 目 录 1.概述 1.1试验背景 为保证无菌检验结果的准确可靠，当建立产品的无菌检查法时，应进行方法的适用性试验，以确认供试品在该实验条件下无抑菌活性或其抑菌活性可以忽略不计，所采用的方法适合于该产品的无菌检查。按照《中国药典》2015年版四部“通则1101无菌检查法”要求，检验程序或产品发生变化可能影响检验结果时，检查方法应进行重新试验。 根据2015年版药典及药品微生物实验室质量管理指导原则要求，检测环境由原来的为C级背景下局部A级空气单向流，在层流净化工作台下进行无菌检测，变更为在C级背景下，无菌检查ORABS隔离系统中进行无菌检测,且由原来的臭氧消毒，变更为臭氧+过氧化氢灭菌消毒；培养基发生变更：由培养真菌用的改良马丁培养基变更为胰酪大豆胨液体培养基，培养温度由23-28℃变更为20-25℃，现针对XXX注射液进行适用性试验，以证明所采用的方法适合该药品的无菌检查。 1.4方案说明 验证过程中严格按照经批准的方案规定的内容进行，若因特殊原因需要变更时，应填写方案变更申请及批准书，报试验领导小组批准。 2.确认目的3.小组人员：根据确定的风险标准对已经识别并分析的风险进行评价，即通过风险的严重性和可能性从而确认风险的等级。 ① RPN16 或严重程度=4 高风险水平：此为不可接受风险。必须尽快采用控制措施，通过提高可检测性及/或降低风 险产生的可能性来降低最终风险水平。验证应首先集中于确认已采用控制措施且持续执行。 由严重程度为4 导致的高风险水平，必须将其降低至RPN 最大=8。 ② 16≥RPN≥8 中等风险水平：此风险要求采用控制措施，通过提高可检测性及/或降低风险产生的可能性 来降低最终风险水平。所采用的措施可以是规程或技术措施，但均应经过验证。 ③ RPN≤7 低风险水平：此风险水平为可接受，无需采用额外的控制措施。 4.2风险的确认 无菌检查结果不成立 4.3 风险的分析及评价 4.4依据风险分析及评价结果需实施的确认项目 5.试验前准备 5.1文件确认 序号 文件/资料 编号 存放地点 2 3 4 5 6 检查人： 检查日期：复核人： 复核日期：设备名称 型号 编号 检定有效期至 运行检查 培养箱 培养箱 检查人： 检查日期：复核人： 复核日期： 沙氏葡萄糖肉汤培养基 沙氏葡萄糖琼脂培养基 0.9%无菌氯化钠溶液 0.05%（v/v）聚山梨酯80的无菌氯化钠溶液 胰酪大豆胨琼脂培养基 沙氏葡萄糖琼脂培养基 5.3预培养及灵敏度实验检查 5.3.1确认培养基已经预培养实验，并预培养合格。 5.3.2确认培养基已经灵敏度试验检查，并合格。 预培养：胰酪大豆胨液体培养基见【XXXXXX】 硫乙醇酸盐流体培养基见【XXXXXX】 品名 批号 培养日期 培养条件 操作人 结果判断 胰酪大豆胨液体培养基 日 时---- 日 时 硫乙醇酸盐流体培养基 日 时---- 日 时 灵敏度实验：胰酪大豆胨液体培养基见【XXXXXX】 硫乙醇酸盐流体培养基见【XXXXXX】 品名 批号 培养日期 培养条件 操作人 结果判断 胰酪大豆胨液体培养基 日 时---- 日 时 硫乙醇酸盐流体培养基 日 时---- 日 时 5.4菌种确认： 5.4.1确认菌种有效期在合格范围内。 名称 代数 编号 金黄色葡萄球菌 大肠埃希菌 枯草芽孢杆菌 生孢梭菌 白色念珠菌 黑曲霉 6.菌液制备 6.1. 接种金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至胰酪大豆胨琼脂培养基上，接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中，30?35°C培养18?2 4小时；取金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌斜面菌苔至3mlXXX注射液中混匀，取1ml至空比浊管与标准比浊管比浊，以至即为100。取100菌液1ml，加入9ml 0.9%无菌氯化钠溶液中，做为10-1稀释液，依次稀释至10-8。取10-5~10-8稀释级按平皿计数法计数菌落数，根据结果取菌落数小于100cfu的稀释级作为试验菌液。 6.2接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中，30?35°C培