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RNA干涉 百度首页|登录 新闻网页贴吧知道MP3图片视频百科文库 帮助设置 首页 自然 文化 地理 历史 生活 社会 艺术 人物 经济 科学 体育 红楼梦 欧冠 核心用户 rna干涉目录 RNAi RNAi的机制转录水平和翻译水平 转录后水平 RNAi应用前景抗病毒感染方面 基因治疗和抗肿瘤方面 在寄生虫基因功能研究和抗寄生虫药物方面 在自身免疫性疾病方面 其他应用 RNAi RNAi的机制 转录水平和翻译水平 转录后水平 RNAi应用前景 抗病毒感染方面 基因治疗和抗肿瘤方面 在寄生虫基因功能研究和抗寄生虫药物方面 在自身免疫性疾病方面 其他应用 展开 编辑本段RNAi 　　RNA干涉是在演化中保留下来的一个过程，通过该过程，双链RNA诱导目标基因沉默。 　　1995年，康乃尔大学的Su Guo博士在试图阻断秀丽新小杆线虫（C. elegans）中的par-1基因时，发现了一个意想不到的现象。她们本是利用反义RNA技术特异性地阻断上述基因的表达，而同时在对照实验中给线虫注射正义RNA（sense RNA）以期观察到基因表达的增强。但得到的结果是二者都同样地切断了par-1基因的表达途径。这是与传统上对反义RNA技术的解释正好相反的。该研究小组一直没能给这个意外以合理解释。 　　直到1998年2月，华盛顿卡耐基研究院的Andrew Fire和马萨诸塞大学医学院的Craig Mello才首次揭开这个悬疑之谜。通过大量艰苦的工作，他们证实，Su Guo博士遇到的正义RNA抑制基因表达的现象，以及过去的反义RNA技术对基因表达的阻断，都是由于体外转录所得RNA中污染了微量双链RNA而引起。当他们将体外转录得到的单链RNA纯化后注射线虫时发现，基因抑制效应变得十分微弱，而经过纯化的双链RNA却正好相反，能够高效特异性阻断相应基因的表达。该小组将这一现象称为RNA干扰（RNA interference ,简称RNAi）。 　　由于基因的功能无法表达而不能显现,故又将此现象称基因沉默(gene silencing)。现在研究证明，RNAi现象存在于各种无脊椎动物、脊椎动物、哺乳动物中，例如果蝇、锥虫、涡虫、水螅、线虫、斑马鱼以及小鼠，甚至在原核生物如大肠埃希菌中都广泛存在。 编辑本段RNAi的机制 　　基因所携带遗传信息(即单个基因的具体功能)的传递是通过名为信使RNA的分子进入细胞蛋白合成“工厂”而实现的，而基因功能的研究方法一直是研究工作的拦路虎。Fire和Mello通过线虫实验证实：某些分子触发了特定基因上RNA的破坏，导致蛋白无法合成，出现“基因沉默”，而这一过程便被称为RNAi。天然的RNAi现象存在于植物动物和人类等真核生物的体内，在调解基因活力和预防病毒感染方面起到重要作用。同时他们还发现了有效关闭基因表达的方法，这样当某一特定基因被“沉默”后，其功能便反向的体现出来了。 　　RNAi的作用机制尚未完全清楚，据目前的研究成果看来主要有3种形式，即转录水平、翻译水平和转录后水平。其中转录后水平是RNAi在各种生物中实现的主要方式，其机制研究也较深入。 转录水平和翻译水平 　　转录水平上的干扰机制是通过对靶基因染色质结构的改变，使其基因转录受限，导致表达系统的关闭。dsRNA被降解成21个～23个核苷酸长的小片段RNA 时,这些小的RNA分子在细胞核可以诱导组蛋白H3的基因及相应DNA的甲基化[1]。这种序列特异性甲基化的信号与RNA和DNA结合有关。当dsRNA 含有与启动子同源的序列,即可使同源靶启动子序列甲基化,从而使靶启动子失去功能,导致下游基因沉默，则转录不能进行。若甲基化出现在编码区，转录能进行，但在转录后水平上沉默。非致病病毒造成转录水平的基因沉默，最先发现于菜花样花叶病毒上,其35 S启动子转录得到含有胭脂碱合成酶启动子(NOSpro)序列的NOSpro RNA。在转基因烟草中,据报告未腺苷酸化的NOSpro dsRNA可以诱导同源NOSpro DNA的甲基化,并使拷贝在转录水平上反式失活。在链孢霉属,DNA的甲基化可能是异染色质的siRNA介导的组蛋白H3 K9的甲基化,是由H3甲基转移酶催化的[2]。翻译水平上的干扰机制，是通过抑制相应mRNA的翻译,使相应的蛋白质表达受阻。其中起重要作用的是微RNA(micro-RNA，miRNA)，它是由长度约70 nt的RNA形成的茎环样前体,经?Dicer?酶作用后形成长约21 nt～25 nt的单链RNA,与相关蛋白结合成RISC复合体。然后识别并结合在mRNA的3′末端非翻译区上,阻止核糖体与mRNA的结合及核糖体的移行，从而抑制翻译的进行。 转录后水平 　　目前, 在有关RNAi发生机制的研究中, 转录后水平上的干扰是研究的最多、最