课内生物化学49920.docVIP

一、核酸是遗传物质，1868年瑞士Miesher.从脓细胞的细胞核中分离出可溶于碱而不溶于稀酸的酸性物质。间接证据：同一种生物的不同种类的不同生长期的细胞，DNA含量基本恒定。直接证据：T2噬菌体DNA感染E.coli。用35S标记噬菌体蛋白质，感染E.coli，又用32P标记噬菌体核酸，感染E.coli。核酸基本组成单位核苷酸。核苷酸可分解成核苷和磷酸，核苷可分解为碱基和戊糖。戊糖有两种，D-核糖和D-2-脱氧核糖。 （一）碱基:分两类：嘌呤和嘧啶。1.嘧啶碱是嘧啶的衍生物，三种：胞、尿和胸腺嘧啶。尿嘧啶只存在RNA中，胸腺嘧啶只存在DNA中，但在某些tRNA中也有极少量。胞嘧啶为两类核酸共有，在植物DNA中还有5-甲基胞嘧啶，一些大肠杆菌噬菌体核酸中不含胞嘧啶，而由5-羟甲基胞嘧啶代替。因受到氮原子的吸电子效应影响，嘧啶的2、4、6位容易发生取代。2.嘌呤碱由嘌呤衍生而来，常见两种：腺嘌呤和鸟嘌呤。嘌呤分子接近平面，但稍有弯曲。自然界中还有黄嘌呤、次黄嘌呤、尿酸、茶叶碱、可可碱和咖啡碱。前三种是嘌呤核苷酸的代谢产物，抗氧化剂，后三种含于植物中，是黄嘌呤的甲基化衍生物，具增强心脏功能作用。此外，一些植物激素，如玉米素、激动素也是嘌呤类物质，可促进细胞的分裂、分化。一些抗菌素是嘌呤衍生物，如抑制蛋白质合成的嘌呤霉素。生物体中（A+T）/（G+C）称为不对称比率，不同生物有所不同。3.稀有碱基:核酸中还有一些含量极少的稀有碱基，大多数是甲基化碱基。甲基化发生在核酸合成后，对核酸的生物学功能具重要意义。核酸中甲基化碱基含量不超过5％，tRNA中可达10％。 （二）核苷:是戊糖与碱基缩合而成。糖的第一位碳原子与嘧啶的第一位氮原子或嘌呤的第九位氮原子以糖苷键相连，一般称为N-糖苷键。戊糖是呋喃环，C1是不对称碳原子，核酸中的糖苷键都是β糖苷键。碱基与糖环平面互相垂直。在tRNA中含有少量假尿苷（用Ψ表示）是由D-核糖的C1与尿嘧啶的C5相连生成。 （三）核苷酸:核苷中的戊糖羟基被磷酸酯化，就形成核苷酸。核糖核苷的糖环上有三个羟基，可形成三种核苷酸：2’、3’和5’-核糖核苷酸。脱氧核糖只有3’和5’两种。生物体内游离存在的多是5’核苷酸。用碱水解RNA可得到2’和3’核糖核苷酸的混合物。稀有碱基也可形成相应核苷酸。 （四）多磷酸核苷酸： 5’-NDP是核苷的焦磷酸酯，5’-NTP是核苷的三磷酸酯。最常见的是5’-ADP和5’-ATP。ATP上的磷酸残基由近向远以αβγ编号。外侧两个磷酸酯键水解时可释放出7.3千卡能量，而普通磷酸酯键只有2千卡，所以被称为高能磷酸键（～P）。因此ATP在细胞能量代谢中起极重要作用，许多化学反应需要由ATP提供能量。高能磷酸键不稳定，α磷酸则稳定得多。利用这一特性可测定ATP和ADP中不稳定磷的含量。细胞内的多磷酸核苷酸常与镁离子形成复合物存在。GTP,CTP,UTP在某些生化反应中也具传递能量作用，不普遍。UDP在多糖合成中可作为携带葡萄糖的载体，CDP在磷脂合成中作为携带胆碱的载体。各种三磷酸核苷酸都是合成DNA或RNA的前体。鸟嘌呤核苷四磷酸酯和五磷酸酯在代谢调控中起作用，在大肠杆菌中，它们参与rRNA合成的控制。 （五）环化核苷酸:磷酸同时与核苷上两个羟基形成酯键，形成环化核苷酸。最常见是3,5-环化腺苷酸(cAMP) 和cGMP。它们是激素作用的第二信使，起信号传递作用。可被磷酸二酯酶催化水解生成相应的5-核苷酸。 二、核苷酸的功能:1.作为核酸的成分2.为需能反应提供能量。UTP用于多糖合成，GTP用于蛋白质合成，CTP用于脂类合成，ATP用于多种反应3.用于信号传递。如cAMP、cGMP是第二信使4.参与构成辅酶。如NAD、FAD、CoA等都含AMP成分5.参与代谢调控。如鸟苷四磷酸等可抑制核糖体RNA的合成。 三、核酸的一级结构： (一)、DNA的一级结构1.定义：DNA是由成千上万个脱氧核糖核苷酸聚合而成的多聚脱氧核糖核酸。它的一级结构是它的脱氧核苷酸分子种类、数目、连接方式及排列顺序，即碱基序列。2.结构：DNA的一级结构是4种脱氧核苷酸（dAMP、dGMP、dCMP、dTMP）通过3/、5/-磷酸二酯键连接起来的线形多聚体。3’、5’-磷酸二酯键是DNA、RNA的主链结构 。前一个核苷酸的3’－羟基与后一个的5’－磷酸结合。链中磷酸与糖交替排列构成脱氧核糖磷酸骨架，链的一端有自由的5’－磷酸基，称为5’端；另一端有自由3’－羟基，称为3’端。在DNA中，每个脱氧核糖连接着碱基，碱基的特定序列携带着遗传信息。（二）、DNA的二级结构1、双螺旋结构的建立.实验依据是Chargaff研究小组对DNA化学组成进行的分析研究，即DNA分子中四种碱基的摩尔百分比为A=T、G=C、A+G=T+C（