中学教育【专题9】生物技术实践.docVIP

【专题九】生物技术实践 【考情分析】 本专题内容包括选修一《生物技术实践》的全部内容微生物的培养花药离体培养技术的操作及与植物组织培养的区别；成分的提取蛋白质的分离。 【知识综合】 一、传统发酵技术的应用传统发酵技术温度为1518 ℃，此温度不适于细菌、酵母菌和曲霉的生长消毒和灭菌的区别 结果 常用的方法 应用的范围 消毒 较为温和的物理或化学方法 仅杀死物质表面或内部一部分对人体有害的微生物 煮沸消毒法 一般物品 巴氏消毒法 不耐高温的液体 化学药剂消毒法 用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源等 灭菌 强烈的理化因素 杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子 灼烧灭菌 接种工具 干热灭菌 玻璃器皿、金属工具 高压蒸汽灭菌 培养基及容器的灭菌 平板划线涂布平板常用方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数。稀释涂布平板法统计样品中菌落的数目往往比实际数目低。这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。酵母细胞的固定化 （1） 包埋法：适合于较大的细胞 化学结合法 物理吸附法 （2）直接使用酶、固定化酶、固定化细胞的比较 方法 优点 缺点 直接使用酶 催化效率高、耗能低、污染低 对环境条件非常敏感、易失活；难回收，成本高，影响产品质量 固定化酶 既能与反应物接触，又能与产物分离；可以反复利用 不利于催化一系列的酶促反应 固定化细胞 成本低、操作容易 反应物不易与酶接近，尤其是大分子物质，反应效率下降 五种重要物质的提取 （1）提取方法总结 提取物质 提取方法 提取原理 步骤 DNA 盐析法 ①DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同；②DNA不溶于酒精，但某些蛋白质则溶于酒精 ①溶解在2mol/L的NaCl溶液中；②加水稀释至0.14mol/LNaCl溶液使DNA析出过滤；③加入冷却酒精析出。 血红蛋白 凝胶色谱法 根据相对分子质量的大小 ①样品处理；②粗提取；③纯化；④纯度鉴定 电脉法 根据各种分子带电性质差异及分子本身大小、形状的不同 玫瑰精油 水蒸气蒸馏法 利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来 ①水蒸气蒸馏；②分离油层；③除水过滤 橘皮精油 压榨法 通过机械加压，压榨出果皮中的芳香油 ①石灰水浸泡、漂洗；②压榨、过滤、静置；③再次过滤 胡萝卜素 萃取法 使提取物溶解在有机溶剂中，蒸发后得到提取物 ①粉碎、干燥；②萃取、过滤；③浓缩 （2）DNA粗提取与鉴定 ①哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核，不适于作DNA提取的材料，但却是提取血红蛋白的理想材料。 ②实验过程中两次用到蒸馏水：第一次目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出DNA，第二次目的是稀释NaCl溶液。 ③鉴定DNA加入二苯胺试剂并沸水浴加热，观察是否出现蓝色。 （3）血红蛋白的提取和分离操作程序 ①样品处理：红细胞的洗涤（除去血浆蛋白等杂质）、血红蛋白的释放（使红细胞胞破裂，血红蛋白释放出来）、分离血红蛋白溶液（经过离心使血红蛋白和其他杂质分离开来）。 ②粗分离——透析：除去样品中分子量较小的杂质。 ③纯化：一般采用凝胶色谱法对血红蛋白进行分离和纯化。 ④纯度鉴定：一般用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳方法，来测定蛋白质的分子量。 I卷·34,12分）下列是与微生物培养有关的问题，请回答： （1）某细菌固体培养基的组成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中凝固剂是＿＿＿＿＿＿＿，碳源是＿＿＿＿＿＿＿，氮源是＿＿＿＿＿＿＿。已知只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，故该培养基属于＿＿＿＿培养基。按照化学成分分类，该培养基属于＿＿＿培养基。从同化作用类型上看，用该培养基培养的细菌属于＿＿＿＿。 （2）将少量细菌接种到一定体积的液体培养基中，适宜条件下培养，定时取样测定菌体数目，以时间为横坐标，以细菌数目的对数为纵坐标，可得到细菌的＿＿＿＿＿＿曲线。该曲线中以菌体数目的对数作为纵坐标的原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。实验室中，为了获得形态和生理特征一致的菌体，一般应在＿＿＿期取材；在生产中，常搜集培养至＿＿＿期的细菌用于次级代谢产物的提取。 答案：（1）琼脂 葡萄糖 尿素 选择 合成 异养型 （2）群体生长 菌体数目往往非常大，且变化率也很高，以菌体数目的对数为纵坐标有利于作图 对数 稳定 解析：本题主要考查学生的理解能力，考查微生物的营养。 第（1）小题，该培养基中，琼脂为凝固剂，葡萄糖为碳源，尿素为氮源；由于只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，可以用来选择出能够合成脲酶的细菌，在功能上称为选择培养基；由于其化学成分明确