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第一章 发酵工程 1．发酵工程定义 定义1：发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物细胞作为产品的工业生产过程。 定义2 ：发酵工程是指在最适发酵条件下，在发酵罐中大量培养细胞和生产代谢产物的技术。 2．发酵工程的发展历史大致可分为三个阶段：传统（古老）发酵技术阶段（纯培养技术建立之前）近代发酵技术阶段（20世纪20年代—70年代） 现代发酵技术阶段（20世纪70年代以后） 3．为什么能利用微生物进行发酵生产：微生物繁殖速度快，代谢能力强，易培养，容易改造 代谢产物多样，能利用廉价的有机物、无机物。 4．发酵工程的特点（与化学工业相比）1 原料广泛2 生产安全、设备简单3 反应专一性强、副产物少4 代谢多样、应用广泛5 易受污染、无菌要求严格6 菌种的优劣影响较大。 第二章 工业用微生物菌种 1．工业用菌种的特点及要求：1具有稳定的遗传学特性2能利用低价的原材料3长条件易于满足4于细菌，具有抗Phage的能力5酵周期短，降低生产成本 6谢产物无毒无害 2．发酵工业常用微生物从菌种的遗传学特征上可以把菌种分为：野生型和改良型 从微生物分类学的角度分为：1细菌类2酵母菌3霉菌4放线菌 菌种选育的目的：防止菌种退化，提高生产能力，简化生产工艺，开发新产品 菌种选育方法：基因突变—自然选育，诱变育种基因重组—杂交育种（原生质体融合），基因工程 自然选育：利用微生物自然突变进行菌种选育的过程，一般习惯称为菌种的分离纯化。 自然选育的目的：纯化菌种、复壮菌种、稳定生产、提高产量。 自然选育方法步骤：通过表观形态来淘汰不良菌株（初筛）通过目的代谢物产量考察（副筛）菌种纯度试验（纯度验证）传代稳定性试验（传代试验）。 各种生产菌适宜的保藏方法——酵母菌：定期移植斜面低温保藏法，石蜡油保藏法 曲霉菌：砂土保藏法 真菌（只长菌丝不长孢子的菌）：采用液氮超低温冻结保藏，石蜡油保藏法 细菌：斜面低温保藏法，冷冻干燥保藏法 放线菌：砂土或冷冻保藏法 8．菌种的退化：生产菌株遗传标记的丢失，导致生产能力下降，即负突变,称为菌种的退化 9．菌种退化的原因：内因—基因突变，分离现象，质粒脱落；外因：保藏方法不当，营养条件不适，传代次数过多 10．防治菌种退化的措施：从菌种选育方面考虑：控制传代次数,合理传代，采用不易衰退细胞传代，采用有效的保藏方法 11．菌种衰退时应采取的提纯复壮措施：分离纯化，通过寄主体进行复壮，淘汰衰退的个体 12．种子扩大培养: 指将保存的处休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养,最终获得一定数量和质量纯种的过程。这些纯种培养物称为种子。 13．扩大培养的目的：为发酵提供大量的、新鲜的、具有较高活力的菌种驯化菌种 14．优质种子具备的特征① 活力强② 生理性状稳定③ 适宜的菌体总量和浓度④ 不带杂菌⑤ 良好的生产性能（高产、稳定） 15．培养基选择的原则：培养基的原料比较精细，质量较高。C/N比大有利于长孢子 N源丰富, 有利于长菌丝 16．车间种子接种方法: 微孔接种法——孢子悬浮液接种，火焰保护接种法——摇瓶菌丝接种，压差接种法——罐与罐间的移种 17．种子罐的级数:指制备种子需逐级扩大培养的次数。 18．接种龄：菌体从开始至移入下一级罐的培养时间 19．接种量：种子液体积和接种后培养液体积之比。 20．影响种子质量的因素：培养基（C/N、无机盐、微量元素、原料产地、加工方法等）培养条件（温度、湿度、PH 、DO 、时间等）斜面菌种保藏时间种龄接种量 第三章 微生物的代谢理论及应用 1．同工酶调节的意义同工酶是生物体对环境变化或代谢变化的另一种有利的调节方式。当其中一种同工酶受到抑制或缺损时，另外的同工酶仍在起作用，从而保证微生物细胞的代谢继续进行。 2．多功能酶一般是指在结构上只有一条多肽链，但具有两种或两种以上的催化活力或结合功能的蛋白质。 3．微生物代谢调节的主要方式：酶活性的调节，酶合成的调节 4．阻止酶合成的现象称为阻遏 5．营养阻遏：微生物细胞在其所处的环境条件下，首先利用其细胞中已有的酶系降解最易利用的生长底物，必要时才会去合成降解另一种生长底物的酶系。 6．能荷(Energy charge,简写为EC):指对ATP、ADP、AMP系统中高能磷酸键的量度。 表示细胞中的能量状态，可用下式来表示 系统中： 只有ATP时，EC值为100%；有AMP时，EC值等于零；全部为ADP时， EC值为50% 7．能荷调节：即通过改变ATP、