大孔树脂纯化川芎总提物工艺描述.ppt

大孔树脂纯化川芎总提物工艺研究 刘友平 一.大孔吸附树脂在中药有效成分分离纯化中的应用 　 大孔树脂是20 世纪70 年代末发展起来的一类有较好吸附性能的有机高聚物吸附剂， 不溶于酸、碱及有机溶剂，对氧、热、化学试剂稳定及机械强度高的有机高分子聚合物，具有良好的吸附性能。现已广泛应用于中药有效成分的分离纯化。 作为一种新型分离纯化方法，选择不同类型树脂，可以对中药中的多种有效成分达到富集纯化作用 。 本研究采用大孔树脂纯化川芎总提物，以阿魏酸为指标，通过树脂筛选，系统研究了中极性大孔树脂DM301对川芎乙醇提取物中阿魏酸的纯化作用，实验结果表明，该树脂能有效富集纯化阿魏酸，精致度高。 二.川芎及川芎总提物 川芎为伞形科（Umbelliferae）植物川芎Ligusticum chuanxiong Hort.的干燥根茎。味辛、微苦、性温，有活血化瘀、理气止痛等作用。常用于头痛、肋痛及心脑血管等疾病的治疗。 川芎总提物（Ligusticum wallichii auct. Sin. Non. Franch）。味苦、辛；气味浓香稍有麻舌感，微回甜。 主要成分为生物碱和酚酸类成分。有活血行气，通经活络，祛风止痛作用。 川芎总提物经文献报道，生产工艺主要为乙醇提取，大孔树脂纯化。本研究主要就树脂纯化部分进行了系统研究，确定纯化工艺。 三.研究内容 1.树脂的预处理及装柱 取大孔树脂用95%乙醇浸泡24 h，乙醇湿法装柱，用乙醇在柱上流动清洗，不时检查流出的乙醇液，至乙醇液与水混合(1:5) 不呈白色浑浊为止，使用前以大量蒸馏水洗去乙醇至无醇味。 2.不同型号大孔吸附树脂吸附量和解吸率的比较 量取各型树脂（干重约1g）置150mL具塞锥形瓶中，分别精密加入川芎提取液90mL(经测定阿魏酸浓度为0.29mg·mL-1，约含生药量0.25g·mL-1)静置24h，充分吸附后，滤过。测定滤液中剩余阿魏酸量。将吸附平衡后的树脂转移至锥形瓶中，用95%的乙醇解吸，测定解吸液中阿魏酸的含量。计算解吸率。 表1 各类大孔吸附树脂物理性能 3 DM301型树脂纯化工艺动态吸附阶段 3.1 径高比的考察 3.2上样药液生药浓度的确定 3.3 动态泄漏曲线 4. DM301型树脂纯化工艺动态解析阶段 4.1 洗脱剂的选择 按上述确定的工艺条件，取4份上样液通过4根装有 DM301型树脂柱进行动态吸附，先用蒸馏水洗至Molish反应成阴性，再分别用20％乙醇，30％乙醇， 50％乙醇，95％乙醇洗脱，收集洗脱液测定阿魏酸量及固形物量，计算阿魏酸含量及洗脱率。 4.2 洗脱溶媒用量的确定 取一定量上样液依法上柱，先用蒸馏水洗至Molish反应成阴性，再用30%乙醇10BV洗脱，以1BV/份收集流份。测定各流份中阿魏酸含量，计算洗脱率与固形物量，绘制洗脱率与收集份数曲线图 表6 洗脱试验数据 5.树脂重复使用次数的考察 按上述确定的吸附、洗脱条件,取样品溶液进行上柱、吸附和洗脱计算，在同一根柱子上重复操作5次，分别计算阿魏酸比吸附量，结果见下表7。 表7 树脂重复使用后阿魏酸比吸附量的变化 四 结论及讨论 川芎所含化学成分复杂，有酚酸类、生物碱、多糖、挥发油等。酚酸类成分含量少，富集、纯化存在一定困难。川芎中酚酸性成分主要有阿魏酸、瑟丹酸、香草醛、香草酸、咖啡酸等，本研究以阿魏酸为指标考察了对此类成分的富集纯化，结果满意。 本研究采用大孔树脂纯化川芎提取物，使有效成分阿魏酸得到有效富集，确定了最佳工艺条件为：采用DM301大孔吸附树脂，径高比为1:8、上样浓度0.2g药材?ml-1、上样量4.5g·g-1（药材:干树脂）上柱吸附。分别以蒸馏水6BV、30%乙醇4BV依次洗脱，弃去水洗脱部位，收集30%乙醇洗脱部位，精制率达到883.35%。 川芎总提物据文献报道主要有效成分为酚酸类成分及总碱，研究中曾采用盐酸川芎嗪为指标考察大孔树脂对川芎嗪的富集纯化作用，但未检测到该成分，对总