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动物生化 第一章 核酸与蛋白质化学 1.DNA和RNA在化学组成上、分子结构上、生物学功能上各有何特点？ 答：化学组成上DNA主要含有脱氧核糖核苷酸，磷酸基团，以及碱基；RNA含有核糖核苷酸，磷酸基团，碱基。要注意的就是其中胸腺嘧啶只存在于DNA中，尿嘧啶只存在于RNA中，其他碱基是它们所共有的。 分子结构上DNA是双螺旋结构，两条链碱基互补；RNA是单链结构 生物功能上DNA是生物体内的主要遗传物质，承载者生物体的主要遗传信息。 RNA主要分三类，即tRNA（转运RNA）, rRNA（核糖体RNA）, mRNA（信使RNA）。 mRNA是合成蛋白质的模板，内容按照细胞核中的DNA所转录； tRNA是mRNA上碱基序列（即遗传密码子）的识别者和氨基酸的转运者； rRNA是组成核糖体的组分，是蛋白质合成的工作场所。 2.简述DNA双螺旋结构模型的基本要点。 答：有两条DNA单链，反向平行，一段由3’端开始，一段由5‘端开始，螺旋成双链结构。 外部是磷酸和脱氧核糖交替构成的 内部碱基遵循碱基互补配对原则（A-T,C-G） 碱基之间是由氢键连接 脱氧核苷酸之间由磷酸二脂键链接。 3.核酸的碱基互补规律是什么？ 答：在DNA分子结构中，由于碱基之间的氢键具有固定的数目和DNA两条链之间的距离保持不变，使得碱基配对必须遵循一定的规律，这就是A（腺嘌呤）一定与T（胸腺嘧啶）配对，G（鸟嘌呤）一定与C（胞嘧啶）配对，反之亦然。 4.RNA有哪些主要类型,其结构与功能有何异同点？ 答：类型：mRNA、tRNA和rRNA；hnRNA、snRNA、miRNA、iRNA等。 相同点：都是通过3′，5′-磷酸二酯键连接而成的单链多聚核糖核酸。 不同点 mRNA：携带从DNA编码链得到的遗传信息，并以三联体读码方式指导蛋白质生物合成的长链RNA，由编码区、上游的5′非编码区和下游的3′非编码区组成。约占细胞RNA总量的3%～5%。真核生物mRNA的5′端带有7-甲基鸟苷-5′-三磷酸的帽子结构和3′端含多腺苷酸的尾巴。 tRNA：通过单链自身回折成三叶草形状，它由3个环，即D环〔因该处二氢尿苷酸（D）含量高〕、反密码环（该环中部为反密码子）和TΨC环〔因绝大多数tRNA在该处含胸苷酸（T）、假尿苷酸（Ψ）、胞苷酸（C）顺序〕，四个茎，即D茎（与D环联接的茎）、反密码茎（与反密码环联接）、TΨC茎（与 TΨC环联接）和氨基酸接受茎〔也叫CCA茎，因所有tRNA的分子末端均含胞苷酸（C）、胞苷酸（C）、腺苷酸（A）顺序， CCA是连接氨基酸所不可缺少的〕，以及位于反密码茎与TΨC茎之间的可变臂构成。三级结构呈“L”状。 rRNA：rRNA的分子量较大，结构相当复杂，目前虽已测出不少rRNA分子的一级结构，但对其二级、三级结构及其功能的研究还需进一步的深入。rRNA与核糖体蛋白结合成核糖体。真核生物核糖体中通常含28S、18S、5.8S和5S 四种rRNA；原核生物中则含23S、16S和5S 三种rRNA。 5.什么叫增色效应？以及变性后出现增色效应的原因。 答：增色效应是由于DNA变性引起的光吸收增加称增色效应,也就是变性后 DNA 溶液的紫外吸收作用增强的效应。 原因是DNA 分子中碱基间电子的相互作用是紫外吸收的结构基础 , 但双螺旋结构有序堆积的碱基又 束缚 了这种作用。变性 DNA 的双链解开 , 碱基中电子的相互作用更有利于紫外吸收 , 故而产生增色效应。DNA分子之所以具有紫外吸收是因为DNA分子中存在嘧啶碱基和嘌呤碱基，而不是什么碱基共轭效应。而变性会使在DNA双螺旋内侧的碱基暴露，因此其吸光值更高。 6.核酸杂交的技术基础是什么？有哪些应用价值？ 答：核酸杂交的分子基础是：碱基互补配对原则。可通过特定序列的探针检测样品中是否含有与之同源的核酸序列。基因克隆的筛选,酶切图谱制作,基因组中特定基因序列的定量和定性检测,基因突变分析,疾病的诊断、微生物病原体检测。 7.组成蛋白质的基本单位是什么？其结构特点如何？ 答：蛋白质的组成单位是氨基酸。组成蛋白质的氨基酸有20种，均为α-氨基酸。每个氨基酸的α-碳上连接一个羧基，一个氨基，一个氢原子和一个侧链R基团。 8.常用的分离纯化蛋白质的方法有哪些？其作用原理是什么？ 答：1、沉淀， 2、电泳：蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的，在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同，有薄膜电泳、凝胶电泳等。 3、透析：利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。 4、层析： a.离子交换层析，利用蛋白质的两性游离性质，在某一特定PH时，各蛋白质的电荷量及性质不同，故可以通过离子交换层析得以分