基因工程载体描述.ppt

第三章 基因工程载体 1. 载体 （Vectors） 2. 基因工程对载体 的要求 3. 载体 的种类 第一节 质粒载体 二、质粒载体的构建 （2）筛选标志不理想 ColE1 2. 质粒载体必须具备的基本条件 3. 质粒的选择标记及其工作原理： 常用抗菌素的抗性工作原理 ii）氯霉素（chloramphenicol，Cml） iii）卡那霉素（kanamycin，Kan） iv）链霉素（Streptomycin，Str） v）四环素（Tetracycline，Tet） ② 遗传标记 （2）抗菌素选择原理 4. 人工构建的质粒载体的类型 （2）低拷贝数的质粒载体 （3）失控的质粒载体 （4） 插入失活型质粒载体 （5）正选择的质粒载体 （6） 表达型质粒载体 ① 表达载体的结构 五、经典的大肠杆菌质粒载体 （4）克隆位点 2. ColE1 （4）克隆位点 （5）ColE1的选择缺陷 3. pBR322： （5）pBR322的优点 ③ 高拷贝数 （6）pBR322的缺点 （7）pBR322的改进 ② 改造EcoR I 位点 4. pUC系列 （1）元件来源 pUC18/19 （4）选择标记 ② ?-半乳糖苷酶Xgal显色反应： ③ lacZ的?肽互补 2）受体菌lacZ突变（lacZ?M15） 3）载体lacZ’与?互补 4）?互补的插入失活 ④ IPTG的诱