基因组序列诠释描述.pptVIP

3.确定DNA序列中基因的位置 A 通过对全长cDNA序列的测序、对比，以及与基因组DNA的比较，确定基因所在的区域； B 通过物种已建立遗传图和物理图来确定基因的位置； 4.实验确认基因功能 4.1 基因剔除(knock-out) 最简便的基因失活的方法. 主要原理: 在一段无关DNA 片段的两侧连接与代换基因两侧相同的序列,将这一构建导入目的细胞,由于同源片段之间的重组,可使无关片段取代靶基因,整合到染色体中.为了便于筛选,用于取代的外源DNA中含有报告基因. 4.2 基因超表达 通过增加基因的拷贝数和采用强启动子促使基因超表达,致使受体表现出生长与发育的异常,来研究基因的功能. 4.3反义RNA 反义RNA是由基因的负链编码,可与正义RNA (sense RNA)或DNA 编码顺序结合,干扰mRNA 的转录,加工和转运,调控基因的表达. 构建反义RNA 表达载体: 将全目的基因或部分目的基因反向插入表达载体 → 转化目标生物 →获得转基因个体或品系 → 分析转基因植株在生理、生化、形态等方面的变异 → 判别目的基因的功能 正义表达载体 反义表达载体 反义RNA 作用机理： A 干扰翻译的起始与延伸，可与翻译起始顺序及编码序列结合形成双链RNA，随之被细胞降解。 B 与mRNA