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细菌检索.细菌鉴定及检索检验科 2009-12-15 08:43:37 阅读221 评论0 字号：大中小 订阅 . 微生物菌种鉴定（Identification of Bacteria）是微生物分类学（ classification of microorganism）的一个部分。人们在进行微生物工作时，往往要求知道工作菌株的名称，菌种鉴定就是将自己所欲鉴定菌株的主要特征与合适的检定手册中所列的各种菌的特征相对照，以便在较短时间内能找出该菌的名称。各类微生物的特性不一，各有不同的检定系统，但工作方法基本相同。这里以细菌鉴定为例介绍细菌鉴定的基本程序和常用的鉴定手册。　　鉴定步骤可按下列程序进行：（1）根据鉴定对象，选用合适的分类系统和工作用的检索表；（2）所用菌株必须绝对纯洁；（3）仔细阅读检索表的内容，选择鉴定时所需的试验方法；（4）按照正确的操作，将试验结果详细记录，并逐条与检索表的内容查照。一般情况下，可以比较容易地查出所鉴定的未知菌株的属（Genus）名，如希望定出种（Specis）名，就应当进一步找出正式的菌种鉴定分类的专著中所列菌种名称。　　目前国际上最负盛名的细菌分类鉴定系统是《伯杰氏细菌鉴定手册》（Bergeys manual of Determinative Bacteriology），这本书自 1923年刊出第一版后，到 1994年已出第九版。书中对细菌的划分并不强调在进化中的相互关系，而目的在提供为细菌鉴定用的系统，是依据形态，鉴别染色反应，细胞壁化学成分，对氧的需求以及生理生化特性而编排。由于分子遗传学的技术应用到细菌学分类，例如细菌的碱基比值（G+ C％），核酸杂交（DNA-DNA，DNA-RNA）；特别是16S rRNA 序列的比较研究，对微生物之间的关系和进化途径有了比较深入的认识，1984年《伯杰氏系统细菌学手册》（Bergeys Manual of Systematic Bacteriology）第一版问世，在细菌分类的系统中也反映出细菌进化的关系，认为古细菌与真细菌虽然表型相似，但就细胞成分及16S rRNA 序列的比较，在生物进化树上处于不同的分枝。所有真核生物包括原生动物、真菌、动物和植物则又是另一分枝。这就是在Woese研究16S rRNA 序列的基础上，提出的生物三原界（Prokingdom）学说，即古细菌原界、真细菌原界和真核生物原界。　　现将从《伯杰氏细菌系统学手册》中，部分重要细菌类群的重要属及其特性加以综合，并参考周德庆：《微生物学教程》，高等教育出版社，1993，388，表11-6略加修改，整理。如下表以供参考：　　国内习惯常用的细菌鉴定系统以中国科学院微生物研究所细菌分类组编著的《一般细菌常用鉴定方法》（科学出版社，1978年版）和王大耜编著的《细菌分类基础》（科学出版社，1977年版）二书最为常用。　　由王大耜编著的《细菌分类基础》（科学出版社，1977）书中在细菌鉴定中介绍了三个检索表，第一个是常见细菌初步检索表。未知菌株接种在数种不同培养基上，包括无氮培养基、无机氮培养基、肉汁蛋白胨培养基以及葡萄糖酵母膏培养基和血洋菜培养基上，经培养观察菌体形态和鉴别染色，有时再辅助若干生理生化反应的试验结果。可以将菌株归划到大的类群，一般可检索到科（Family），科以下再按各科检索表查到属。另二个检索表是分别检索革兰氏染色阴性和革兰氏染色阳性细菌的，可以检索到属。现将这三个表分别列下：（一）常见细菌初步检索表　　在好氧条件下一般培养基上常见细菌的初步检索表　　1．细胞始终为球状菌 2　　幼龄细胞非球状，而是杆状或螺旋状 6　　2．在无氮培养基上生长良好，能固定大气氮　　固氮菌科（Azotobacteraceae）　　需要无机氮或有机氮才能生长 3　　3．革兰氏染色阴性，有体液时才生长良好　　奈瑟氏球菌科（Neisseriaceae）　　革兰氏染色阳性到革兰氏染色不稳定；在肉汁胨培养基或酵母膏　　葡萄糖培养基上生长 4　　4．细胞成链、成对、少数为四联状，产乳酸，接触酶阴性　　乳酸细菌科（Lactobacillaceae）的链球菌族（Streptococceae）　　细胞不明显成链，不产乳酸 5　　5．细胞大小不均一，形状不甚圆，有的有棱角，排列不规则。有类似出芽繁殖者 芽生球菌属（Mycococcus）　　细胞大小比较均一，排列成单个、成对、四联、八叠、或不规则的堆团。　　微球菌科（Micrococaceae）　　6．球状细胞萌发成杆状，革兰氏染色阴性或不定；老培养物则又转为类球菌状，多呈革兰氏染色不定或阳性。杆状菌呈多形态，形状不规则　　节细菌属（Arthrobacter）　　幼培养物与老培养物无上述特征 7　　7．细胞杆状 8　　细胞螺旋状或弧状 螺菌科（Spirilla