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基于Pd非标记型C-反应蛋白免疫传感器的研制
4- / 3-Vol. 36摇摇摇摇摇摇高等学校化学学报摇摇摇摇摇No. 102015 年 10 月CHEMICAL JOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES摇1880 ~ 1887摇摇doi: 10. 7503 / cjc于 Pd / COF鄄LZU1 非标记型 C鄄反应 蛋白免疫传感器的研制刘婷知, 夏介仁, 李摇 瑶, 陈文凯, 张摇 帅,刘摇 仪, 郑摇 丽, 杨云慧( 云南师范大学化学化工学院, 昆明 650500)摘要摇 采用溶剂热法, 通过有机单体合成了一种亚胺键连接的共价有机框架材料(COF鄄LZU1); 在常温常压 条件下, 通过后合成的方法将贵金属钯( 域) 引入到 COF 材料中, 合成了复合材料 Pd / COF鄄LZU1, 该材料具 有优良的催化性能. 利用 Pd / COF鄄LZU1 多孔复合材料将 C鄄反应蛋白(CRP) 抗体(anti鄄CRP) 固定在玻碳电极表面, 构建了一种非标记型 CRP 免疫传感器. 当抗体与抗原发生免疫反应时, 形成的免疫复合物会阻碍电化学探针[Fe(CN)6 ]的电子传递, 降低其响应电流, 从而实现 CRP 的快速检测. 采用交流阻抗和差示脉冲伏安法(DPV) 考察了免疫传感器的电化学特性, 同时考察了测试底液的 pH 值、 抗原培育时间和抗体固定浓度等实验条件对传感器性能的影响. 在最优的实验条件下, 采用 DPV 法对 CRP 进行检测的线性范围为5 ~ 180 ng / mL, 检出限为 1郾 66 ng / mL, 线性相关系数为 0郾 992.关键词摇 钯负载共价有机框架材料; C鄄反应蛋白; 免疫传感器; 非标记型中图分类号摇 O657郾 1摇 摇 摇 摇 文献标志码摇 AC鄄反应蛋白(C鄄Reactive protein, CRP) 是机体组织感染、 炎症及受损时引起某些血清蛋白浓度的变 化而刺激肝细胞合成的急性相蛋白. CRP 是炎症的一种敏感性指标, 正常情况下以微量形式存在于血 浆中, 当机体有炎症及创伤时此蛋白含量会明显升高. 近年来研究发现, 血浆 CRP 水平与动脉粥样硬 化的发生、 发展、 预后及危险因素有一定的相关性, 是动脉粥样硬化的重要介质[1] . CRP 的检测被广泛用于监测不同的炎症状态, 也可用于监测对炎症的治疗效果. 随着高灵敏度检测方法的不断发展, CRP 还是心血管疾病的有效预测因素[2] . 同时, 血清中 CRP 是监控早期心脏受损的一项指标, 是最新发现的冠心病相关炎性因子, 在冠心病的诊断过程中发挥着重要的作用[3,4] .目前, 临床上诊断血清中 CRP 常用的检测方法有比浊法[5] 和免疫浊度法[6] , 以及酶联免疫吸附、 化学发光、 荧光及放射等方法[7] . 这些方法虽然灵敏度高、 特异性强, 但也存在如设备昂贵、 操作繁 琐, 需专业人员操作, 检测时间长, 样品消耗量大及成本高等缺点, 且容易产生假阴性结果. 因此, 迫 切需要找到一种快速检测 CRP 的方法. 电化学免疫传感器将免疫分析技术与电化学传感器相结合, 具 有成本低、 灵活性强灵敏度高和检测快速方便等优点, 在临床检测中应用广泛, 因而最具有发展前景. Zhou 等[8] 采用聚二甲基硅氧烷/ 金纳米颗粒复合微流体芯片研制了 CRP 电化学免疫传感器.近年来, 大量介孔材料由于其介孔结构有利于反应物分子接触孔道内部的活性位点, 已成为研究 的热点[9] . 共价有机框架材料(COFs) 是近年来科学家新发现的一种结构较为稳定的、 靠共价键结合的新型晶形多孔材料[10,11] , 它具有大的共轭体系, 是性能优良的导电材料, 而且层与层平行堆积结构的 COF 材料具有开放的孔道, 有利于电子在其中传递[12,13] . COF 材料与无机分子筛[14] 和金属有机骨架 材料(MOFs) [15,16] 的性质相似, 具有二维或三维的多孔结构, 且比表面积大. 与其它多孔材料相比, 这 种晶性多孔结构的 COFs 材料更稳定, 在气体储存分离[17,18] 、 催化[19] 和光电[13] 等方面都具有广泛的 应用前景. 2011 年, Wang 等[19] 首次报道了 COF 材料在催化领域中的应用, 用价格低廉易得的前体收稿日期: 2015鄄04鄄28. 网络出版日期: 2015鄄09鄄18.基金项目: 国家自然科学基金( 批准号: 资助.联系人简介: 杨云慧, 女, 博士, 教授, 主要从事电分析化学与生物传感器方面的研究. E鄄mail: yyhui2002@ aliyun. com摇 No. 10摇刘婷知等: 基于 Pd / COF鄄LZU1 非标
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