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四 病理变化 特点为在器官组织中发生增生性货渗出性炎症,货两者混合存在。 抵抗力强时,对分枝杆菌主要以细胞增生为主,形成增生性结核结节,即增生性炎。由类上皮细胞和巨噬细胞集结在菌周围,形成特异性肉芽肿。 抵抗力低,主要以渗出性炎性为主,在组织中有纤维细胞和淋巴细胞的弥漫性沉淀,发生干酪样坏死、化脓或钙化,主要见于肺和淋巴结。 结核结节 1 牛 牛结核病病灶,见于肺和其他器官常见许多突起白色结节,呈干酪样坏死或钙化,切开时有砂砾感。有的软化、溶解,形成空洞。 当肺结核时,肺上具有多量粟粒大小的微透明的结节,增大并由纤维蛋白包围,呈现粟粒性结核病病变。 胸腔与腹腔浆膜表面出现粟粒至豌豆大小、半透明的灰白色坚硬结节,形如珍珠。 肠结核发生于小肠或盲肠,于肠粘膜表面形成大小不等的结节或溃疡。溃疡周围呈堤状,底部坚硬并覆有干酪样物。 五 检测方法 细菌学检测 细菌学检查的方法有涂片镜检、细菌培养等临床上样品中的牛分枝杆菌可通过涂片抗酸染色、镜检并 通过细菌培养做出确认。 抗酸染色结果 2 结核菌素实验 包括提纯结核菌素(PPD)和老结核菌素(OT)诊断方法。它主要是用提纯的 PPD 进行牛皮内接种,于 72~96h 后观察有无热、痛、肿胀等反应对可疑的牛需 60d 后再次复检。 该方法检出率和准确率都比较高。 PPD 作为皮肤试验最大的缺点就是易呈现假阳性和假阴性反应。 the Mantoux test 结核菌素试验 结核菌素试验结果 结核菌素试验结果分析 阳性 强阳性 阴性 硬结、红肿直径 0.5-1.5cm之间 有结核免疫力 不表示正患结核病 硬结直径超过1.5cm以上 表明可能有活动性结核,应进一步检查 注射部位有针眼大的红点或稍有红肿,硬结直径小于0.5cm 无结核免疫力, 但应考虑: 原发感染的早期 正患严重结核病 正患其他传染病(麻疹) 3 酶联免疫吸附试验(ELISA) 此类方法均是利用抗原抗体反应检测针对牛结核分枝杆菌抗原的循环抗体目前用于检测的抗原有PPD、ESAT -6、CFP10、MPB59、MPB64 MPB70、MPB80、MPB83、Ag85、LAM(脂阿拉伯甘露聚糖)、LPS(脂多糖) 4 γ-干扰素试验 将试验牛血样的淋巴细胞加入特异性 PPD 一起孵育 16~24h,由于致敏的淋巴细胞能够释放出 γ-干扰素,因此可用 INF-γ-ELISA 进行定量测定 5 PCR技术 聚合酶链式反应(PCR)对人结核和牛结核的诊断有很高的应用价值。 五 防控与治疗 主要采取综合性防疫措施,防止疾病的传入;对已经存在结核病的畜群,通过加强检疫、隔离、淘汰等做好净化污染群。 当前对阳性结核病病畜不能根治,加上费用开支大等原因,通常各养殖场均不实施药物治疗,应尽早淘汰。 对于人结核病主要措施是早期发现,严格隔离,彻底治疗。牛奶应该煮沸后饮用;婴幼儿普遍注射卡介苗;与病人病畜接触时应注意个人防护。治疗人结核病主要有链霉素、异烟肼和对氨基水杨酸钠等。 六 疫苗研究方向 卡介苗(BCG)被应用于结核病流行的一些国家。不幸的是BCG疫苗对牛和其它动物没起到完全的预防作用,因为BCG在长期的体外增殖过程中可产生许多突变。此外,接种疫苗的动物降低了结核菌素皮试的阳性效果。开发新的疫苗应该说有很重要的意义。 1 MPB83蛋白 MPB83 是牛分枝杆菌分泌性蛋白之一,又是与菌体表面相关的脂蛋白,它在体内可引发细胞免疫及体液免疫,是牛分枝杆菌重要的免疫保护性抗原。 2 ESAT-6蛋白 免疫学试验证明在 ESAT-6 蛋白上存在着 T 细胞和 B 细胞抗原表位,能够诱导强的细胞免疫和体液免疫应答;可在再次感染的早期诱导T细胞迅速增值和释放高水平的γ干扰素,同时激活巨噬细胞,控制结核病感染。 七 致病性研究 结核分枝杆菌不产生内、外毒素。其致病性可能与细菌在组织细胞内大量繁殖引起的炎症,菌体成分和代谢物质的毒性以及机体对菌体成分产生的免疫损伤有关。 致病物质与荚膜、脂质和蛋白质有关。 八 为什么结核分枝杆菌持续感染致病 4. 1 在巨噬细胞中成功繁殖。 4. 2 结核分枝杆菌能够修饰宿主的免疫反应, 使宿主能够控制但不能根除细菌。 4. 3 能够在宿主中相对不活跃地持续存在而保留被激活的潜力。 1 荚膜 荚膜的主要成分为多糖,部分脂质和蛋白质其对结核分枝杆菌的作用有 ①荚膜能与吞噬细胞表面的补体受体3(CR3)结合,有助于结核分枝杆菌在宿主细胞上的粘附与入侵; ②荚膜中有多种酶可降解宿主组织中的大分子物质,供入侵的结核分
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