第5章核酸的化学范例.ppt

（三） Southern印迹法 分子生物学技术 用于检测DNA 方法：如图 Northern 印迹法：用于检测RNA （四）聚合酶链  式反应（polymeerase chain reaction, PCR) 聚合酶链式反应（PCR） 每一轮聚合酶链式反应可使目的基因片段增加一倍 30轮循环可获得—— 230（1.07×109)个基因片段 应用： 广泛用于克隆、测序、产生特异突变、医学诊断和法医. 原理： 碱基配对； 聚合酶可催化在试管内合成与模板互补的 DNA新链； 双脱氧核苷酸无3’-OH，合成到此终止； 可电泳分离随机得到的大小不等的片段。 （五）核酸序列测定 核酸序列测定 * 1）tRNA结构： 一级结构多已清楚， 含较多稀有碱基； 二级结构为三叶草 有：aa臂、 二氢嘧啶环、 反密码环、 可变环、 TΨ 环 P198 RNA 主要特征： 1.四臂四环； 2.氨基酸臂3′端有CCAOH的共有结构；3.D环上有二氢尿嘧啶（D）； 4.反密码环上的反密码子与mRNA相互作用；5.可变环上的核苷酸数目可以变动； 6.TψC环含有T和ψ；7.含有修饰碱基和不变核苷酸。 tRNA 三级结构 为倒L型 A、在pr合成中转运aa； B、在pr合成的起始、DNA反转录