第7章蛋白质的分离、纯化和表征范例.pptVIP

吃柿子小心胃结石！ 年龄偏大的人，消化功能减退，多食易得柿石病。空腹也不要多吃柿子。 如果连皮一起吃更容易形成胃结石，皮中含的鞣酸更多。 含高蛋白的蟹、鱼、 虾在鞣酸的作用下， 很易凝固成块，形 成胃结石。 6.加热变性沉淀法 几乎所有的蛋白质都因加热变性而凝固。少量盐促进蛋白质加热凝固。 当蛋白质处于等电点时，加热凝固最完全和最迅速. 如：煮鸡蛋 卤水点豆腐 （少量MgCl2加入到大豆 蛋白质的浓热溶液中） 四、蛋白质分离纯化的一般原则 总目标：增加制品纯度或比活 1.前处理：因动/植物/细菌而异 2.粗分级分离：采用盐析/等电点沉淀/有机溶剂分级分离等方法 3.细分级分离：采用凝胶过滤、离子交换层析、吸附层析以及亲和层析等 4.结晶 五、蛋白质的分离纯化方法 (一)根据分子大小不同的纯化方法 1、透析和超过滤 利用蛋白质分子不能透过半透膜将其 与小分子物质分开 半透膜为玻璃纸或纤维素材料 血液透析 小分子溶出 小分子被带出 透析机 透析液 加压 血液 2、密度梯度（区带）离心 60000~80000转/分 重力60万～80万倍 3、凝胶过滤 （二）利用溶解度差别的纯化方法 1.等电点沉淀 调整溶液pH 不同蛋白在各自 pI处依次沉淀 2.盐溶和盐析 3