2沙眼衣原体感染实验室诊断20160613概要.ppt

沙眼衣原体感染的实验室诊断 河北省疾病预防控制中心 性病艾滋病防治所 赵翠英 病原体 淋球菌 梅毒螺旋体 生殖器疱疹病毒 生殖道沙眼衣原体 乳头瘤病毒 HIV病毒 杜克雷噬血杆菌 衣原体 念珠菌 滴虫 疥虫 阴虱 肝炎病毒 －－－ 病 种 淋病 梅毒: 生殖器疱疹: 生殖道沙眼衣原体感染: 尖锐湿疣: HIV感染/艾滋病: 软下疳: 性病性淋巴肉芽肿: 念珠菌性阴道炎: 滴虫性阴道病: 疥疮: 阴虱病: 肝炎（乙、丙）： －－－ 性传播疾病(STD)/性传播感染(STI) 梅毒 淋病 软下疳 性病性淋巴肉芽肿 非淋菌性尿道炎 生殖器疱疹 尖锐湿疣 HIV/AIDS 梅毒 淋病 软下疳 性病性淋巴肉芽肿 50-60年代 经典性病 80-90年代 监测性病 目 前 传染法报告病例 监测性病 梅毒 淋病 沙眼衣原体感染 生殖器疱疹 尖锐湿疣 我国主要流行的性传播疾病（性病） 沙眼衣原体: 30%～50% 生殖支原体: 10%～40% 其它: 20%～30% 梅毒 淋病 HIV/AIDS 2007年卫生部《全国性病监测方案》要求 监测性病5种：TP，NG，CT, HSV, HPV 沙眼衣原体作为独立病种报病 沙眼衣原体感染后： 约70％女性和50％男性为无症状 86％的女性和55％的男性感染者持续感染时间为1年以上。 不寻求治疗……. 可逆行感染： 1.女性：盆腔炎、输卵管炎、不孕、流产和死胎等 2. 男性：附睾炎、前列腺炎和不育 3. 新生儿：结膜炎、肺炎及Reiter综合征（反应性关节炎） 近年来研究： 引起活动性关节炎，与动脉硬化、冠心病有关；细胞内生长导致与HIV感染的促进作用 沙眼衣原体感染已成为全世界范围的公共卫生问题! 实验室检测是控制传播的最有效手段 一级预防：倡导性行为的改变（推迟首次性交年龄，减少性伴，使用安全套等） 二级预防：检测与治疗（性病患者及性伴；孕妇新生儿；普通人群无症状感染传播 三级预防：检测与治疗并发症 沙眼衣原体感染病例定义 《全国性病监测方案》,2007 流行病学史：有不安全性行为，或性伴感染史 临床表现;男性尿道炎、附睾炎等，女性宫颈炎、盆腔炎 实验室检查：CT抗原或核酸或培养阳性 确诊病例：符合1+2+3或2+3者， 无症状感染病例：符合3且没有临床症状者。 沙眼衣原体生物学特性 衣原体属微生物 具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA 具有合成蛋白质、核酸和脂类的能力 不能产生三磷酸腺苷（ATP），完全依靠宿主细胞提供必须的能量 沙眼衣原体病原学 具有原体和始体二个发育型 原体有传染性。原体一旦进入细胞内，就发育为始体 始体具有新陈代谢活性，行二分裂增殖，生长成具有传染性的原体，然后释放出来去感染邻近的细胞 从感染细胞到释放出原体大约需要35-48小时 严格细胞内寄生 生活特性：原体和始体 正常生活周期 持续性感染 沙眼衣原体病原学 沙眼衣原体血清分型和致病性 沙眼衣原体有15个血清型, A, B, Ba, C,D-K, L1, L2, L3 － A，B，Ba和C型最常引起沙眼 － D-K型主要感染泌尿生殖道 － L1,L2,L3型引起性病性淋巴肉芽肿 物理和化学因素对沙眼衣原体的影响 温度 衣原体对热敏感，其传染性在60℃ 10分钟完全丧失 化学制剂 衣原体很容易被乙醚、福尔马林、 酚等化学制剂灭活 发病机理 衣原体感染人体后， →柱状上皮→单核巨噬细胞→繁殖→细胞死亡， 细胞内增值可逃避宿主免疫防御功能，得到间歇性保护。 衣原体的致病机理是抑制被感染细胞代谢，溶解破坏细胞并导致溶解酶释放，代谢产物的细胞毒作用，引起变态反应和自身免疫。 沙眼衣原体的检测 常用实验室方法 标本涂片染色直接镜检 抗原检测试验,包括衣原体抗原免疫快速法、直接免疫荧光法和酶联免疫吸附试验 核酸检测，多采用实时荧光PCR法 细胞培养法 一、直接涂片法（姬姆萨染色）：方法：涂片－姬姆萨染色－镜检包涵体 沙眼衣原体包涵体姬姆萨染色临床应用： 眼部感染：敏感性95％， 男性尿道：敏感性15％， 宫颈感染：敏感性41％。 应用范围：眼部标本。 二、沙眼衣原体抗原检测试剂盒-艾博 检测方法 使用前将试剂、裂解液和样本恢复到室温（15-30℃）。 1 将试剂放置在干净的水平台面上； 2 在裂解管中竖直滴入无色的裂解液A 5滴，立即放入棉签样本（宫颈拭子），用手指挤压裂解管中的棉签头，并转动棉签15次，静置2分钟； 检测方法 3 在同一裂解管中竖直滴入裂解液B 6滴，混合液可能产生沉淀为正常现象。用手指挤压裂解