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生物选修三复习导纲提纲（五） 专题二 细胞工程 2.2动物细胞工程 2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体 【课前导学】 基础知识 一、动物细胞融合 1.概念：指????????? 或????????? 动物细胞结合形成一个细胞的过程，也称细胞杂交。 2.结果：融合形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为?????????? 细胞。 3.：细胞膜的????????? 。 4.：物理方法、化学方法、生物方法。 5.过程：6.意义：细胞融合突破了有性杂交方法的局限，使????????? 成为可能。这一技术成为研究????????? 、????????? 、肿瘤和生物????????? 培育的重要手段。 .抗体：淋巴细胞（浆细胞）产生的，化学本质为????????? ，具有特异性。从血清中分离出的抗体????????? 、纯度低、特异性差。 .哺乳动物感染病原体（如病毒、细菌等）后，体内会形成相应的B淋巴细胞。B淋巴细胞能分泌????????? ，凝集或杀死这些病原体。但是每一个B淋巴细胞只分泌????????? 。因此，要想获得大量的????????? ，必须克隆??????????? ??? ，形成????????? 。 单克隆抗体的制备 （1）过程： （2）杂交瘤细胞的特点：既能大量????????? ，又能产生??????????? 。 .单克隆抗体的应用 （1）单克隆抗体的优点：????????? 强、????????? 高，并可能???????????。 优点：疗效高，毒副作用小。 植物细胞杂交(番茄马铃薯植株) 动物细胞融合(单克隆抗体制备) 过?? 程 第1步 原生质体的制备(酶解法) 正常小鼠的处理(注射灭活抗原) 第2步 原生质体的融合(物化法) 动物细胞融合(物化生法) 第3步 杂种细胞的筛选和培养 杂交瘤细胞的筛选和培养 第4步 杂种植株鉴定 提纯单克隆抗体(特异性强、灵敏度高) 原理/理论基础 细胞膜的流动性、植物细胞的全能性 细胞膜的流动性、细胞增殖 融合前处理 酶解法除去细胞壁：纤维素酶、果胶酶 注射特定抗原法免疫处理正常小鼠 促融因子 物理法：电刺激、离心、振动 化学法：聚乙二醇 物化法：与植物相同 生物法：灭活的仙台病毒 意义和用途 (1)克服有性远缘杂交不亲和性障碍 (2)培育作物新品种 有助于疾病的诊断、治疗、预防 提示：哺乳动物感染抗原后，其体内会形成相应的B淋巴细胞，B淋巴细胞能分泌相应的抗体凝聚或杀死这些抗原。动物在免疫反应的过程中，每一种B淋巴细胞能分泌一种特异性抗体，要想获得大量的特异性抗体，必须使能分泌该单一抗体的B淋巴细胞大量增殖。B淋巴细胞具有产生单一抗体的能力，但不能在体外增殖；骨髓瘤细胞是一种癌细胞，它能在体外培养条件下无限增殖，但不能产生抗体。因此，把一种B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合，产生杂交瘤细胞，它会兼有两个亲本细胞的特性──在体外培养条件下能不断增殖，同时能产生出某种特异性的抗体。 三、杂交瘤技术制备单克隆抗体的主要步骤 （1）抗原制备；（2）免疫动物； （3)免疫脾细胞和骨髓瘤细胞的制备；（4)细胞融合； （5）杂交瘤细胞的选择培养；（6）杂交瘤细胞的筛选；（7）杂交瘤细胞的克隆化； （8）单克隆抗体的检定；（9)分泌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立；（10）单克隆抗体的大量制备。 【典例反馈】 例.只能使动物细胞融合的常用诱导方法是(??? ) A.PEG ?????? B.灭活的病毒 ???? C.电刺激 ??????????D.离心 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。在这种培养基上不能存活、增殖的细胞是：①B淋巴细胞? ?????????②小鼠骨髓瘤细胞?? ??????③B淋巴细胞自身融合细胞? ?④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞⑤杂交瘤细胞 A.①②③④??????? ??B.①③⑤??????? ????C.②④??????? ?????D.①③．下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是A．培养中的人效应T细胞能产生单克隆抗体　B．培养中的人B细胞能够无限地增殖 C．人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株　　D．用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞 ．单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是A．特异性强、灵敏度高 　　　 B．与抗癌药物结合可制成“生物导弹” C．体外培养B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体 D．由效应B细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌 ．关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是 A．可以制成诊断盒．用于疾病的珍断 B．可以与药物