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2016第二节基因工程及其应用
基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。 通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物 的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放 到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的性状。 常用的运载体: 质粒、噬菌体和动植物病毒 * * * * 基因工程及其应用 原理:基因重组 操作水平:DNA分子水平 操作环境:生物体外 结果:定向改造生物的性状,获得人类所需要的品种。 目的基因 供体细胞 受体细胞 基因操作的工具 1.基因的“剪刀”──限制性内切酶(限制酶) 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切割点上将DNA 分子切断。 专一性 2、基因的针线──DNA连接酶 连接酶的作用是:将互补配对的两个黏性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子。 3、基因的运输工具——运载体 标记基因,便于进行检测。 四个基本步骤: 1)提取目的基因 2)目的基因与运载体结合 3)将目的基因导入受体细胞 4)目的基因的检测和表达 (三)基因操作的基本步骤 目的基因 目的基因是人们所需要转移或改造的基因。 如苏云金芽孢杆菌的抗虫基因,还有植物的抗病(抗病毒、抗细菌)基因、种子贮藏蛋白的基因,以及人的胰岛素基因、干扰素基因等。 直接分离基因 人工合成基因 目的基因的提取方法 (三)基因操作的基本步骤 (三)基因操作的基本步骤 步骤二:目的基因与运载体重组 1)用一定的限制酶切割质粒,使其出现一个切口,露出黏性末端。 2)用同一种限制酶切断目的基因,使其产生相同的黏性末端。 3)将切下的目的基因片段插入质粒的切口处,再加入适量DNA连接酶,形成了一个重组DNA分子(重组质粒) 目的基因与运载体的结合过程,实际上是不同来源的基因重组的过程。 (三)基因操作的基本步骤 常用的受体细胞: 有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞等。 将目的基因导入受体细胞的原理 借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。 步骤三:目的基因导入受体细胞 (三)基因操作的基本步骤 步骤四:目的基因的检测和表达 四环素 抗性基因 氨苄青霉 素抗性基因 不能,受体细胞必须表现出特定的性状,才能说明目的基因完成了表达。 (三)基因操作的基本步骤 受体细胞摄入DNA分子后就说明目的基因完成了表达吗? 若不能表达,要对抗虫基因再进行修饰。 二、基因工程的应用 生长快、耐不良环境、肉质好的转基因鱼(中国) 乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷) 1、基因工程与作物育种 转黄瓜抗青枯病基因的甜椒 转鱼抗寒基因的番茄 转黄瓜抗青枯病基因的马铃薯 不会引起过敏的转基因大豆 2、基因工程与药物研制 我国生产的部分基因工程疫苗和药物 许多药品的生产是从生物组织中提取的。受材料来源限制产量有限,其价格往往十分昂贵。 微生物生长迅速,容易控制,适于大规模工业化生产。若将生物合成相应药物成分的基因导入微生物细胞内,让它们产生相应的药物,不但能解决产量问题,还能大大降低生产成本。 胰岛素从猪、牛等动物的胰腺中提取,100Kg胰腺只能提取4-5g的胰岛素,其产量之低和价格之高可想而知。 将合成的胰岛素基因导入大肠杆菌,每2000L培养液就能产生100g胰岛素!使其价格降低了30%-50%! 3、基因工程与环境保护 ⑴ 环境监测: 基因工程做成的DNA探针能够十分灵敏地检测环境中的病毒、细菌等污染。 1t水中只有10个病毒也能被DNA探针检测出来 利用基因工程培育的“指示生物”能十分灵敏地反映环境污染的情况,却不易因环境污染而大量死亡,甚至还可以吸收和转化污染物。 ⑵ 环境污染治理: 基因工程做成的“超级细菌”能吞食和分解多种污染环境的物质。 通常一种细菌只能分解石油中的一种烃类,用基因工程培育成功的“超级细菌”却能分解石油中的多种烃类化合物。有的还能吞食转化汞、镉等重金属,分解DDT等毒害物质。 利用基因工程培育的“指示生物”能十分灵敏地反映环境污染的情况,却不易因环境污染而大量死亡,甚至还可以吸收和转化污染物。 * * *
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