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免疫学实验课件 生化与免疫学实验室 中性粒细胞的吞噬作用 【实验目的】 　　1.熟悉中性粒细胞吞噬实验的原理和方法。 　　2.通过本实验理解机体的非特异性免疫机制。 【实验原理】 　　中性粒细胞具有吞噬杀菌功能，当与颗粒性物质（如葡萄球菌等）混合孵育一定时间后，颗粒性物质被吞噬杀灭，根据吞噬率、吞噬指数可反映该细胞的吞噬功能。 【实验材料】 　　1.表皮（白色）葡萄球菌菌液（浓度6~10亿/ml)。 　　2.肝素溶液（25U/ml）；甲醇，碱性美蓝（或瑞氏）染液。 　　3.血红蛋白吸管，凹玻片，载玻片，采血针，微量加样器，湿盒，显微镜，恒温培养箱，75%酒精，棉签，香柏油，二甲苯等。 【实验方法】 　　1、用微量加样器，吸取肝素20ul加入洁净凹玻片凹孔内。 　　2、用酒精棉签消毒手指后，刺破皮肤，以血红蛋白吸管取血40ul，立即放入盛有肝素的凹玻片凹孔内，并充分混匀。 　　3、用微量加样器取葡萄球菌菌液20ul加入上述凹玻片凹孔内，充分混匀。 　　4、将凹玻片置于湿盒内，30℃温箱中30min，其间每隔10min摇匀一次。 　　5、取一小滴上述混合液，置于载玻片上，用另一载玻片推成薄血片，待干。 　　6、滴加甲醇固定3min，水洗。 　　7、加碱性美蓝染色1~2min，水洗，印干。 　　8、置油镜下观察吞噬和未吞噬的白细胞并计数。 【实验结果】 　　　　　　　　 【实验思