免疫实验免疫学及免疫检测技术试验(医学课件).pptVIP

免疫学实验 实验一、外周血单个核细胞的分离 实验二、酶联免疫检测技术（ELISA） 一、原理（续） 二、实验方法： 实验三、纳米金免疫检测技术 一、实验原理 二、实验操作： 三、注意事项： 实验四、免疫荧光检测技术 * 单个核细胞： 一、基本原理 ?常用哪些方法分离细胞，免疫学可采用哪些方法 本实验是利用不同的细胞之间密度不同的性质，通过速度沉降法来分离制备外周血中单个核细胞。 二、操作： 1、稀释血：1ml血+1ml缓冲液（含5～10IU/ml肝素的PBS，无血清 ）（用滴管） 离心 单个核细胞 （斜面！） 2、加于淋巴细胞分离液上层，离心：500g 20min（小于1000rpm)！沿管壁滴加 !淋巴细胞分离液取法 3、吸出细胞，悬于营养缓冲液（1～2倍量含5IU/ml肝素、2％灭活小牛血清的PBS液 ），离心：200g 10min，除去血小板。 4、洗涤：同样营养液洗涤2次，洗去淋巴细胞分离液，离心： 500g 10min 5、检查细胞存活率： （1）将1滴细胞悬液和1滴台盼兰混匀，静置5-10分钟。 （2）上述混合液滴入细胞计数板，在显微镜下观察细胞，计数活细胞数和死细胞数。 三、注意事项： 1。血液制品 2。注意将稀释后的血轻轻地沿管壁铺在细胞分离液上，避免破坏其界面。 3。在收集单个核细胞时，预先将毛细滴管中的气体排空，再将毛细滴管轻轻