微生物复习下案例分析.doc

四 病毒 1病毒的结构和形态 病毒 超显微、无细胞结构、细胞外核蛋白非生命颗粒、专性活细胞寄生，在寄生细胞内以复制而呈现生命特征的生物 病毒颗粒根据有无包膜分为两大类：裸露病毒（naked virus），有包膜病毒（enveloped virus）。 裸露 病毒颗粒根据衣壳粒排列组合成的衣壳(壳体)形态，可分为三类: 二十面体对称衣壳 腺病毒（Adenovirus）线状、双链 DNA 螺旋对称衣壳 烟草花叶病毒 线状 单链DNA 复合对称衣壳（二十面体对称 + 螺旋对称）T4噬菌体 线状 双链DNA 有包膜 艾滋病病毒（HIV） 脂质和少量蛋白存在于包膜类 2原核微生物病毒 T4噬菌体 蛋白衣壳: 复合对称 核心: 线状、双链DNA (dsDNA) 复制循环的三个步骤： 侵染 T4大分子合成 T4早期基因表达---合成早期蛋白 T4晚期基因表达---合成晚期蛋白 早期蛋白 关闭蛋白: 抑制E.coli 大分子合成 更改蛋白： 取代E.coli RNA聚合酶中的σ因子 抗限制性酶系蛋白：使复制的T4 DNA免受E.coli 胞内的限制性酶系破坏。 T4基因组复制酶： 催化T4基因组多拷贝复制。 晚早期蛋白 各种衣壳部件蛋白: 头、尾、尾丝、基板、颈环等部件 组装蛋白: 编码组装酶，装配T4各结构 溶菌酶 子代T4的组装与释放：自我有序组装，T4对E.coli 的杀细胞增殖感染 MS2噬菌体 蛋白质衣壳：180个衣壳粒正二十面体排列，直径约26nm。 核心：＋ssRNA、小基因组（3569个核苷酸），只编码四种蛋白。 吸附、侵染、脱壳 MS2增殖过程 对大肠杆菌杀细胞增殖感染 ФX174噬菌体蛋白质衣壳： 60个衣壳粒二十面体对称，直径约25nm。 核心：环状＋ssDNA，有重叠基因 烈性噬菌体与病毒一步生长曲线 名解 潜伏期 裂解量 裂解量=稳定期受染细胞所释放的全部子代病毒数/潜伏期受染细胞数 =稳定期效价/潜伏期效价 生长曲线制作（4） （1） 用噬菌体的稀释液感染高浓度的宿主细胞（尽可能保证每 个细胞只吸附一个噬菌体） （2） 数分钟后，加入抗噬菌体的抗血清（中和未吸附的噬菌体） （3） 保温培养并定期检测培养物中的噬菌体效价（对噬菌体量进行计数） （4） 以病毒感染时间为横坐标、病毒感染效价为纵坐标，绘制病毒特征性的繁殖曲线 (一步生长曲线) 噬菌体效价测定 噬菌体数量计算方式--噬菌斑 温和噬菌体与溶源性 名解 λ噬菌体 线状双链DNA 特点3 （1）既有增殖裂解途径，又可进入溶源化途径。 （2）进入溶源化途径的噬菌体以原噬菌体或质粒形式存在。 （3）噬菌体对宿主细胞是非增殖、非杀细胞感染。 原噬菌体（prophage）-- 原病毒(provirus) 特点3： （1） 原噬菌体不能复制成病毒粒子。 （2）原噬菌体可长期存在宿主染色体中，宿主细胞不被裂解。 （3）原噬菌体具有从宿主染色体完全切离下来进入复制裂解循环的潜力。 溶源性细菌5 （1）原噬菌体随溶源性细菌繁殖而遗传。 （2）对同种噬菌体具有免疫性。 （3）低频率（10－2～10－5）自发裂解。 （4）理化因素诱导，高频率裂解 。 （5）溶源性转变（lysogenic convertion） λ噬菌体裂解途径和溶源化途径的调控模式 主要受噬菌体cI 基因和cro 基因表达水平的调控。、 cI 基因表达CI阻遏蛋白：促使溶源化，抑制原噬菌体重新转变为烈性噬菌体，保持溶源化。 cro 基因表达Cro阻遏蛋白: 抑制CI阻遏蛋白的合成，促进裂解。 cI 基因表达高于cro 时，λ噬菌体溶源化 cro 基因表达高于cI 时，λ噬菌体进入裂解循环、 3真核生物病毒 与原核生物病毒的区别3 空间上差异 有无内外空间间隔 核糖体差异 噬菌体mRNA可在原核生物70s 核糖体上转译，真核生物病毒mRNA转译前去除内含子，在80s核糖体上转译，加5’端帽子和3’端ploy A。 宿主有无细胞壁差异 原核生物细菌有细胞壁，真核生物动物无细胞壁，而植物有细胞壁。 宿主有无壁决定病毒进、出宿主细胞和脱壳的方式。 无包膜DNA病毒——腺病毒 呼吸道病毒 DNA进核 无包膜RNA病毒－脊髓灰质炎病毒（poliovirus） 肠道病毒 线状、正单链RNA （＋ssRNA） RNA不进核 有包膜DNA病毒—单纯疱疹病毒(herpes simplex virus) 线状 双链DNA 进质膜的时候脱去包膜 有包膜RNA病毒－狂犬病病毒（rabies virus） 线状、负单链RNA 近年危害人类的病毒 有包膜RNA病毒—粘病毒（禽流感病毒）线状、负单链RNA （-ssRNA） 有包膜RNA病毒—冠状病毒（SARS）线状、正单链RNA （＋ssRNA） 有包膜RNA病毒—线状病