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专题1 基因工程 二、DNA连接酶 E·coli DNA 连接酶 T4 DNA 连接酶 DNA连接酶 区别： E·coli DNA 连接酶 只能将双链DNA片段互补的粘性末端之间连接起来，不能将双链DNA片段平末端之间进行连接 T4 DNA 连接酶 既可“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端，又可以“缝合”双链DNA片段的平末端，但连接平末端之间的效率比较低 注意： 1、限制酶、DNA连接酶合称为工具酶 2、限制酶、DNA连接酶作用相反 三、基因进入受体细胞的运载体 作用：与目的基因结合，并将目的基因导入 受体细胞。 常用运载体：质粒、 λ噬菌体衍生物、 动植物病毒 质粒 存在：存在于细菌的拟核以外（细胞质）。 特性：是很小的双链环状DNA分子，在细胞 内能够自我复制。 大肠杆菌质粒的分子结构示意图 作为运载体的条件： （1）必需有一个或多个限制酶的切割位点，以便目的基因可以插入到运载体上去。 （2）必需具备自我复制的能力，或整合到受体染色体DNA上随染色体DNA的复制而同步复制。 （3）必需带有标记基因，以便重组后进行重组DNA分子的筛选。 （4）必需是安全的，不会对受体细胞有害，也就是能够安全地“借居”在受体细胞中。 （5）分子大小应适合，以便提取和在体外进行操作。 实际上