选修1生物技术实践导论.pptVIP

(3)PCR的每次循环可以分为____________________三步。假设在PCR反应中，只有一个DNA片段作为模板，请计算在5次循环后，反应物中大约有____________个这样的DNA片段。 (4)请用简图表示出一个DNA片段PCR反应中第二轮的产物。 解析：(1)DNA聚合酶只能把新的核苷酸加到已经存在的核酸的3′-羟基上，与DNA母链结合的RNA引物就提供这个羟基。 “课下综合检测”见“课时跟踪检测(三十五)” 答案：(1)磷酸基团　3′端 (2)耐高温的Taq DNA聚合酶　选择培养基 (3)变性、复性和延伸　32 点击此图片进入“阶段验收评估（七）” 2.实验操作程序 [效果自评组合式设计] 一、在小题集训中洞悉命题视角 判断有关PCR技术及蛋白质的提取和分离叙述的正误。 (1)利用凝胶色谱法分离蛋白质时，相对分子质量小的先洗脱出来。 ( ) (2)在电泳过程中，蛋白质分子的移动速度，与分子本身的大小和形状无关，而与所带电荷的差异有关。( ) × × (3)在SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳中，电泳迁移速率完全取决于分子的大小。 ( ) (4)DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链，不能从头开始合成DNA。 ( ) (5)在PCR技术中，DNA的合成方向总是从子链的3′端向5′端延伸。 ( ) (6)固定化酶常采用化学结合法和包埋法。 ( ) (7)固定化细胞常采用包埋法。 ( ) √ √ × × √ 二、在回顾教材图表中强化学科能力 1．固定化酶(细胞)的技术的比较 通过物理吸附作用，把酶或细胞固定在纤维素、琼脂糖、多孔玻璃或离子交换树脂等载体上 物理吸 附法 利用共价键、离子键将酶分子或细胞相互结合，或将其结合到载体上 化学结 合法 将酶或细胞均匀地包埋在不溶于水的多孔性载体中 包埋法 图示 原理 名称 2．固定化酶与固定化细胞的比较 固定化酵母细胞 固定化葡萄糖异构酶 实例 可能导致反应效果下降 一种酶只能催化一种或一类化学反应 缺点 成本低，操作更容易 酶与反应物结合，又与产物分离，固定在载体上的酶可反复利用 优点 特点 包埋法 化学结合法、 物理吸附法 适用方法 一系列 一种 固定酶 的种类 固定化细胞 固定化酶 [答案]　C 不同带电颗粒在同一电场中的泳动速度不同 控制离心速率，使分子大小、密度不同的蛋白质沉降分层 蛋白质分子不能透过半透膜 原理 电泳法 离心沉降法 透析法 　 方法 项目　 需要 不需要 需要 是否需要缓冲液 将蛋白质分离开来 将蛋白质沉降分层 将蛋白质和小分子化合物分开 分离结果 电泳法 离心沉降法 透析法 　 方法 项目　 [例2]　(2013·池州高三质检)已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子，分子大小、电荷的性质和数量情况如图所示，下列有关蛋白质分离的叙述正确的是 (　　) [答案]　A 1.细胞内DNA复制与PCR技术的比较 高温 体内温和条件 温度 DNA或RNA RNA 引物 Taq DNA聚合酶 DNA解旋酶、DNA聚合酶 酶 90℃以上高温解旋，双链完全分开 在解旋酶作用下，边解旋边复制 解旋 不同点 PCR 细胞内DNA复制 ①需提供DNA复制的模板； ②四种脱氧核苷酸为原料； ③子链延伸的方向都是从5′端到3′端 相同点 PCR 细胞内DNA复制 [解析]　PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，其延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP和四种脱氧核苷酸。 [答案]　C [课堂考点集训] 考点一　制备和应用固相化酶 1．下列关于固定化酶的说法，错误的是 (　　) A．固定化酶不足之处是不能催化一系列反应 B．固定化酶可再次利用，降低了生产成本 C．固定后的酶既能与反应物接触，又能与产物分离 D．固定化酶易溶于水 解析：固定化酶是将酶固定在不溶于水的载体上，所以固定化酶难溶于水。固定化酶使酶既能与反应物接触，又能与产物分离，同时，固定在载体上的酶还可以被反复利用。 答案：D 答案：A 考点二　蛋白质的分离 3．(2011·广东高考)以下关于猪血红蛋白提纯的描述，不正 确的是 (　　) A．洗涤红细胞时，使用生理盐水可防止红细胞破裂 B．猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋 白较少 C．血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测 D．在凝胶色谱法分离过程中，血红蛋白比相对分子质 量较小的杂蛋白移动慢 解析：生理盐水与细胞内液的浓度相等。可防止红细胞因过量吸水而涨破。在凝胶色谱法分离血红蛋白的过程中，可根据其颜色监测血红蛋白的洗脱情况。蛋白质相对分子质量越大，在凝胶色谱法分离过程中的移动速度越快。 答案：D 解