血液中葡萄糖的测定——邻甲苯胺法一、实验目的.pptVIP

血液中葡萄糖的测定——邻甲苯胺法一、实验目的.ppt

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血液中葡萄糖的测定——邻甲苯胺法一、实验目的

* * 血液中葡萄糖的测定 ——邻甲苯胺法 一、实验目的 掌握血糖的测定方法。 二、实验原理 葡萄糖在热的醋酸溶液中,与邻甲苯胺缩合成雪夫氏碱(Schiff base)。 雪夫氏碱呈兰绿色,其最高吸收峰为630nm波长,颜色深浅与葡萄糖含量成正比。反应式如下: 三、实验器材 分光光度计(630nm),比色皿 计算纸(9 cm×9 cm) 3. 水浴锅 4. 10ml容量瓶 四、实验试剂 1. 邻甲苯胺溶液 2.5g硫脲溶于冰醋酸,加入邻甲苯胺150ml及2.4%硼酸100ml,用冰醋酸定容至1升 2. 葡萄糖标准母液 (10mg/ml,用饱和苯甲酸溶液配制) 3. 血清 (~100ml) 五、实验步骤 取5支10ml容量瓶,标号,依次加入葡萄糖母液0.25,0.5,1.0,2.0,3.0ml,用饱和苯甲酸稀释至10ml,混匀(则上述溶液100ml葡萄糖含量为25,50,100,200,300mg ); 混匀后,置沸水中 15分钟,立即移入冷水浴中冷却; 以0号管调零,在630nm 处比色(见下表),以各管的 吸光度为纵坐标,相应管中葡萄糖含量(mg)为横坐标,绘制标准曲线,并根据测定管吸光度查找含量。 *

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