第二讲生物材料的采集与制备.pptVIP

㈠生物材料的采集 在实验动物功能评价中，需要采集的生物样品主要是血液和尿液及组织脏器，它是反映受试物的生物学效应和物质在体内代谢情况的最为重要的途径。 1．采血 2．采尿 3．骨髓采集： 大动物骨髓采集与人相近，多采取活体穿刺，穿刺部位一般是胸骨、肋骨、髂骨、胫骨、股骨，这些部位具有造血功能。 小动物，一般处死后，取胸骨或股骨，用注射器吸取一定量的HanK’S液冲洗出。 4．组织标本采取和固定 ①选取原则：一般选取正常与病变组织交界处，如果眼看不到明显变化，则各试验组标本部位应均匀一致。 所选取组织应包括脏器的重要结构或全层，如肾皮质，髓质和肾盂，选取时切勿挤压，应用手术刀，少用剪。 ②大小：厚约3～5mm，大小为1.5～2cm2 ③标记：每块标本应用铅笔在纸片上标记好，纱布包扎，投入定液。 ④固定液：标本选取后应尽早浸入固定液，使组织处于生前状态。 电镜标本取活体，1分钟内须浸入固定液。 固定液视情况选用： a. 中性福尔马林液：40%甲醛100ml，酸性磷酸钠4g、磷酸氢二钠6.5g，蒸馏水900ml。此固定液穿透力强，固定均匀，对于脑神经组织及某些酶均有良好的保存作用。一般固定48h。 b. Bouin固定液： 饱和苦咪酸75份，36%甲醛20份，冰醋酸5份，混匀后使用。特点：细胞收缩小，细胞核着色清晰，固定时间24～48h。 c. 戊二醛固定液：