PRVPCV-2PPV多重PCR試剂盒的研制.docVIP

PRV、PCV-2、PPV多重PCR试剂盒的研制 余波 谭诗文*1 冉懋韬1 杨丽娟1徐景峨1 史开志1 （贵州省畜牧兽医研究所，贵州 贵阳550005） 摘要：根据GenBank中的猪伪狂犬病病毒(PRV) gE、猪圆环病毒2型(PCV-2) ORF2、猪细小病毒(PPV) VP2基因序列，设计了3对引物，研制了检测PRV、PCV-2和PPV的多重PCR试剂盒。该试剂盒扩增的阳性条带分别为bp、bp、bp。敏感性、特异性结果显示，该试剂盒对3种病毒的最低核酸检测量分别为PRV 4.2pg/L、PCV-2 3.7pg/L、PPV 0.ng/L，而猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征（PRRSV）、大肠杆菌、猪支原体的扩增结果均为阴性。对125份自然感染病猪样品的检测结果表明，该试剂盒检测结果与单一PCR检测结果完全符合。结果表明该多重PCR试剂盒具有很好的特异性和敏感性，可用于临床PRV、PCV-2和PPV的检测。 PRV）、猪圆环病毒（PCV-2）、猪细小病毒（PPV）造成的猪繁殖障碍性疫病越发严重，常常出现混合感染，给养猪场造成了巨大的经济损失[1-3]。目前，主要的检测方法有病毒分离鉴定、琼脂扩散试验、微量血清中和试验、ELISA、PCR方法。然而常规的诊断方法很难将此症状相似的疾病同时加以区别，而且常规的病原学和血清学检测方法，又存在操作繁杂、费时费力、敏感性低等不足。