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免疫組化SABC法与SV法的比较
博士德免疫组化SABC法与SV法的比较
发布时间：2011-12-08 22:38 点击次数： 186
免疫组化SABC法与SV法的比较
SABC法：ABC代表的是亲和素－生物素－过氧化物酶复合物。利用抗生物素分别连接生物素标记的第二抗和生物素标记的酶。SABC（链霉亲和素生物素过氧化物酶复合物）就是StreptAvidin Biotin Complex的英文缩写。这一方法集中体现了目前最先进的免疫组化所必必具备的高敏感性、特异性及操作快速、简便的所有特征。
基本原理：亲和素（Avidin）存在于鸡蛋中，分子量67000。是一种碱性蛋白质，具有对生物素近乎于共价键的结合力。链霉亲和素是一种从链霉菌（Streptomyces Avidinii）培养物中所提取的蛋白质，分子量47000，不含糖链，等电点IP=6.0-6.5。和亲和素一样，也有四个生物素结合位点，亲和力高达10-15M。和亲和素相比，链霉亲和素更为完美。现在经过改进的亲和素等电点IP可以达到7.0，明显地消除了原碱性蛋白特征所引起的非特异性吸附。
生物素是一种水溶性维生素（即维生素H），分子量244。生物素活化后，可以标记抗体和酶而不影响其活性。链霉亲和素—酶复合物可以起到放大信号的作用，这是SABC具有高度敏感性的基础。
?
SV（Super Vision）两步法：是用聚合标记方法将过氧化物酶连接到二抗上，形成类似于章鱼的超大分子抗体-酶聚合物，替代传统方法中的二抗和三抗。这种聚合物拥有强大的信号放大能力，同时有很强的组织细胞渗透力，经检测其灵敏度高于同类产品，特别是针对核抗原，其渗透性特别强，适合免疫组化的应用。此系列检测试剂与传统的三步法比较具有简单，快速，高敏感，低背景等特点。
原理示意图：
用聚合标记方法将过氧化物酶连接到二抗上，形成类似于章鱼的超大分子抗体-酶聚合物
?
现对这两种方法进行比较：
?一．材料
?所选试剂：
即用型SABC（过氧化物酶）试剂盒（博士德货号 HYPERLINK /products_detail/productId=65a4987e-1b73-4fdc-8a44-578ccbbb0b5ecomp_stats=comp-FrontProducts_list01-1287568234727.html \t _blank SA1021， HYPERLINK /products_detail/productId=7b9cb4ef-0795-423a-b0d7-e871860b110fcomp_stats=comp-FrontProducts_list01-1287568234727.html \t _blank SA1022）
即用型SV（HRP辣根过氧化物酶）试剂盒（博士德货号 HYPERLINK /products_detail/productId=72ddeafd-e28a-48dd-b097-01a5492547b1comp_stats=comp-FrontProducts_list01-1287568234727.html \t _blank SV0001， HYPERLINK /products_detail/productId=b3dbd471-1965-47f8-9cea-5ec20e98a0c7comp_stats=comp-FrontProducts_list01-1287568234727.html \t _blank SV0002）
DAB（黄色，博士德货号 HYPERLINK /products_detail/productId=907e2f95-d5cf-46ae-8f75-43913c2d6c7ecomp_stats=comp-FrontProducts_list01-1287568234727.html \t _blank AR1022）
Mayor`s苏木素（博士德货号 HYPERLINK /products_detail/productId=9ee6d0d0-b903-4461-8201-a7b011ebffb3comp_stats=comp-FrontProducts_list01-1287568234727.html \t _blank AR0005）
?
所选一抗：
HYPERLINK /products_detail/productId=027165b8-f051-4020-abdd-0fa42d357a4ccomp_stats=comp-FrontProducts_list01-1287568234727.html \t _blank KCA3.1（BA1788）； HYPERLINK /products_detail/productId=cc07e334-efb4-49c2-bf94
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