大鼠心肌缺血_再灌注損伤模型的改进与评价.docVIP

第 6卷　第 4期解剖科学进展 2000年 PRO GR ESS O F ANA TOM ICAL SC IEN CES 2000 大鼠心肌缺血再灌注损伤模型的改进与评价 王淑侠　兰小莉1　王吉文2　裴著果 (中国医科大学第二临床学院核医学科　沈阳 110003) 　　摘要　大鼠心肌缺血再灌注损伤是模拟人类心梗及溶栓再通治疗,研究缺血预适应机制,评价抗心律失 常药物疗效常用的动物模型。本文在传统造模方法的基础上进行了一定的改进,采用在压管下加一小垫片的 方法,减少了传统推管法对心表面的机械损伤,方法简便,冠脉阻断确实。结果:大鼠左冠状动脉主干缺血 30′再灌 120′危险区左室重量比为 55%± 5% ,坏死区危险区为 58%± 6% (N = 10)。心肌酶谱结果: 关键词　心肌再灌注损伤;大鼠;模型, T TC染色法 　　阻断冠状动脉造成急性心肌梗塞并在预定时间 2∶1,压力在 5～ 15cm H 2O之间。根据呼吸频率及 内恢复血供予以再灌注是模拟人类心梗及溶栓再通深度调整呼吸参数 (鼠的气管插管可用一次性塑料 治疗常用的实验研究方法。大鼠以其冠脉侧支循环滴管拉制)。右颈总动脉插管,监测动脉血压。胸骨 缺乏、心肌坏死出现早、心律失常发生率高、重复性、 稳定性好、费用低廉而成为制作该疾病模型[ 1 ] ,特别拉两侧肋骨代替开胸器 (对于 270g以下的鼠,需剪 是硕、博士研究生进行课题实验首选的实验动物。笔 者在进行心肌缺血预适应机制的研究中,参照以往 轻轻向上推开,暴露动脉圆锥与左心耳根部间的左 型的制作方法进行了一定的改进,现报告如下: 射性跳动过猛,血管反而暴露不清楚。以左冠状静脉 为标志,用 3 8圆 3×10不锈钢圆针, 3～ 0丝线在 左冠状静脉下缝一针。进针深度应穿过心肌 1mm 健康雄性 W ista r大鼠,体重 240～ 350g (由中 右。采用笔者自行改良的推管法行左冠状动脉缺血 再灌注。即先将线的两端穿过一厚 1mm ,直径约 呼吸机 (浙江医科大学医学仪器实验厂) ;自制简易 血压计 (由 24号套管针、三通开关、U形管内装水 的两线头。用纹式钳向下推动硬塑管,使其连同小垫 由上海第三试剂厂生产;批号 970924用前以 线造成再灌注。以左室前壁紫绀或称蓝紫色及同步 兰 ( Evan s B lue )瑞士 F luka公司出品。电子天平 志。复灌时左室前壁缺血区紫绀消失。 显微镜。 缺血再灌结束后,再次结扎阻断的左冠状动 以 3%戊巴比妥钠按 50m g kg腹腔注射。气管 脉,静脉内注入 2% Evan s B lue 1m l。待鼠口唇兰染 后,取下心脏,剔除心房右室,左室 - 20℃冻 5 　中国人民解放军第 202医院心内科片。置预温 37℃, 1% T TC磷酸缓冲液中染 5 2V o l16　N o 14CK4301±251u l, CK2M B 2288±328u l, LDH 2329±216u l, A ST 371±57u l (N = 5)。左缘约 015cm剪断 3、4肋骨,暴露胸腔。可用线牵断 3、4、5共 3条肋骨,以使心脏暴露良好)。破心包,左手用眼科镊夹一小棉球,用棉球将胸腺及左心耳文献记载的方法[ 2～ 4 ] ,并根据本实验室条件,对该模冠状静脉。注意左手推胸腺时一定要轻,太重心脏反1　材料与方法111　材料左右,进出针间宽度应在静脉周围 115～ 2mm左国医科大学实验动物部提供) ; N iHon Konden型心电图机 (上海 KOND EN医用电子仪器厂) ;小动物2mm的中央有圆孔的软垫,再将线穿过直径115mm长 115cm的硬塑管,轻提从管另一端穿出银,管旁边附有直尺做刻度组成) ;红四氮唑 (T TC )一起压向冠状动脉。夹紧丝线阻断冠脉血流,放松丝011M 1PH 714的磷酸缓冲液配成 1%溶液;伊文斯心电图示 S2T段抬高, Q R S幅度升高为结扎成功标(ER 2182A , A D com p any lim ited) , 01ym p u s实体113　心肌缺血区,坏死区范围的评定112　手术方法插管接呼吸机,按 1～ 1. 5m l 100g潮气量, 70～ 80次分的频率给予呼气末持续正压呼吸,呼∶吸比为20m in。平行房室沟将左室切成 115～ 2mm厚共 5　中山医科大学附属第二医院急诊科 15m in,左室兰染区为非缺血区。坏死心肌呈白色。, ,1 V o l16　N o 14 CK4301±251u l, CK2M B 2288±328u l, LDH