第12章 养需要及饲料营养价值评定的研究方法.docVIP

第十二章 营养需要及饲料营养价值评定的研究方法 评定动物对营养物质的需要和饲料养分利用率是动物营养学的重要内容，经过长时间的发展已形成了一套系统的研究方法。随着动物营养学及相关学科的发展, 研究方法也在不断地改进和完善。对不同的动物，不同的生产目的以及不同的营养物质，其研究方法也不尽一致。本章主要对评定饲料养分利用率及营养需要量中常用的消化实验、平衡实验、饲养实验、比较屠宰实验以及同位素示踪、外科造瘘和无菌技术等作简要介绍。通过对这些方法和技术的认识及了解，掌握研究方法常用的实验设计原理和操作技术。 化学分析法 营养学研究常需对饲料、动物组织及动物排泄物的某些成分，进行定性、定量分析。常用的有pH、光谱、色谱、电泳等物理和化学分析方法。应用最多的是各种比色法、光谱分析及色谱分析。 通过有关化学成分的测定，可为动物营养物质需要量的确定和饲料营养价值的评定提供基础数据，为机体营养缺乏症的早期诊断提供重要的参数。在确定营养需要和评定饲料营养价值中，几乎没有不经过化学成分分析的。动物营养研究中常进行的化学成分分析的对象有饲料、动物各种组织以及粪尿。 一、饲料成分分析 Weende一百多年前提出的常规饲料成分分析方案在营养学中仍然应用最广。随着营养学的发展，除了常规分析的粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、无氮浸出物、粗灰分及干物质，此外，有时还要测定真蛋白(TP)、非蛋白氮、α－氨基氮、氨基酸、各种脂肪酸、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、酸性洗涤木质素、纤维素、半纤维素、木质素、糖、淀粉、矿物质、维生素、真菌及霉菌产物、生物碱、酶以及其它有毒、有害物质等也纳入了分析的内容。通过上述分析可对饲料的营养价值作出初步的估计。 二、粪便成分分析 分析粪便成分是消化实验和平衡实验必需的步骤。测定粪便中粗蛋白、粗纤维和粗脂肪等养分的含量，可用于饲料可消化养分及消化能的估计。研究矿物质元素的代谢，由于每日内源矿物质的排泄量大，粪样分析用于测定矿物质元素的吸收率有较大误差，若与同位素示踪法相结合，结果更可靠。 三、尿成分分析 尿中含有各种无机及有机成分，它们大都是动物体新陈代谢的产物。虽然尿成分的含量受许多因素影响，但正常情况下各种成分都有一定的含量范围，所以通过某些尿成分分析可了解体内代谢和机体营养状况是否正常。有些维生素是以辅酶的形式参与体内物质代谢，它们的缺乏可导致这些有关反应的中断，使尿中一些代谢的中间产物积累和尾产物减少，所以检查这些物质在尿中的排泄量可反映机体的营养状况。例如，叶酸缺乏，尿中亚胺甲基谷氨酸(FIGLV)排泄增加；烟酸缺乏，尿中N─甲基烟酰胺减少；维生素B6缺乏，尿中黄尿酸或犬尿酸的含量增加。 四、动物组织和血液成分的分析 常用于测定的组织有肝、肾、心、骨骼肌、骨(胫骨)、毛发以及全血、血浆、血清和红细胞，甚至整个机体样品，包括组织中各种营养物质及其代谢产物和相关酶(活性)的测定。它是确定各种营养物质需要量的重要依据，也是评价机体维生素、微量元素等营养状况常采用的标识。结合饲养实验、平衡实验和屠宰实验，可确定动物对各种营养物质的需要。 常用作标识的功能酶及相应的微量元素和维生素有：血浆谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)——硒，血清碱性磷酸酶─锌，血浆铜蓝蛋白氧化酶——铜，血浆黄嘌呤氧化酶——钼，血浆中以焦磷酸硫胺素为辅酶的酶-—硫胺素，红细胞中含黄素二核苷酸(FAD)的谷胱甘肽还原酶——核黄素，红细胞或血浆中酪氨酸和天门冬氨酸转氨酶——维生素B6，血浆丙铜酸羧化酶——生物素等。用酶活作为评价机体某些微量元素和维生素的营养状况是较灵敏的指标，缺点是有些酶活的准确测定较困难，主要是样品的保存和测定条件要求严格。 有关动物组织、血液和尿中维生素及微量元素含量、相关酶活性及代谢产物的水平大多数都不是鉴别缺乏症或确定需要量唯一的指标，对某一种或某些动物敏感的指标，不一定适用于另一种或另一些动物。因此，常常把组织、血液或尿中的含量，结合酶活以及生长反应作综合评定。 第二节 消化实验 饲料的化学成分分析只能说明饲料中各种养分的含量，而不能表明它们能被动物消化利用的程度。动物采食的饲料经消化后，从理论上讲，凡是被消化吸收进入体内的养分，只要数量和比例与动物所需完全一致，其利用率应当为100%。但实际上总有一部分营养物质(一般占食入总量的20-30%)不能被吸收，随同消化道分泌物和脱落的肠壁细胞以粪便的形式排出体外。因此，准确测定饲料或饲粮中可消化(可利用)养分的含量具有重要意义，也是评定饲料营养价值的重要方法。 一般将被吸收的养分占食入养分的百分比定为消化率。计算消化率的公式参见本书第二章。养分及能量消化率的测定是通过消化实验来实现的。随着营养学研究的深入, 消化实验也不断改进完善。目前消化实验的内容可用图示