從百合中提取分离秋水仙素的研究进展.docVIP

从百合中提取分离秋水仙素的研究进展 应化1班 U201010305 杨杰 摘要：秋水仙素是从百合科植物秋水仙球茎中提取出的一种天然生物碱，其代谢产物为去甲秋水仙素，为高效抗痛风药，临床应用已有200年历史[1]，用于治疗关节疼痛和痛风。目前，秋水仙素及其衍生物除作为抗痛风、抗肝炎、抗肿瘤等新药外[2]，在农业培育及生物研究中也有较多的应用。从百合中提取分离秋水仙素的方法有：有机溶剂萃取法、回流提取法、超临界二氧化碳流体萃取法、超声波提取法等。本文就以上方法进行了较为详细的讨论。 关键词：百合；秋水仙素；提取分离方法 百合及秋水仙素的简介 1.1百合简介： 百合，是百合科(Liliaceae)百合属(Lilium)所有种的总称,是多年生草本植物,大多都具有根状茎、块茎或者是鳞茎,少数种为乔木、半灌木或灌木[3]。主要分布在亚洲东部、欧洲、北美洲等北半球温带地区。全球已发现有百多个品种，中国是其最主要的起源地。贺世洪等[4]利用极谱法,采用二阶导数直接测定了百合中秋水仙碱的含量。 1.2 秋水仙素简介： 秋水仙素，又名秋水仙碱，是一种生物碱，因最初从百合科植物秋水仙中提取出来，故名，结构式如图1。纯秋水仙素呈黄色针状结晶，熔点157℃。易溶于水、乙醇和氯仿。味苦，有剧毒。秋水仙素能抑制有丝分裂，破坏纺锤体，使染色体停滞在分裂中期[5]。 图1 秋水仙素的结构式 1.2.1.秋水仙素在医学上的应用 1）秋水仙素对原发性痛风[6]有特异作用，可在12～24h内减轻炎症并迅速止痛。 2）秋水仙素是抑制细胞有丝分裂的一个典型代表，可抑制DNA的合成。由于秋水仙素能抑制癌细胞的增长，所以临床上广泛用于治疗癌症，特别对乳腺癌疗效明显，对皮肤癌、肝癌、白血病和何杰金氏病等亦有一定作用。 1.2.2 秋水仙素在科研中的应用 秋水仙素具有独特的性质，能阻碍细胞分裂中纺锤体的形成，故可使植物细胞染色体倍增。因此，秋水仙素在农业上被广泛用于制备有二倍染色体的三倍体、四倍体种子。借此方法，农业专家可做出无籽西瓜、大番茄、葡萄以及维生素含量更丰富的蔬菜等农作物[7]。 2.提取分离方法 秋水仙素的提取方法有：有机溶剂萃取法、回流提取法、超临界二氧化碳流体萃取法、超声波提取法等。 2.1.有机溶剂萃取法 方法1：[8] 秋水仙素是极性分子，与百合中的酸性成分结合而以盐的形式存在，因此，在提取前需对百合粉进行碱化。可以选用氨水做为碱化试剂。 将百合去根，剥片，洗净后于50℃烘烤约10h至干，粉碎，过筛得百合粉。称取百合粉2g,包好后用μm的滤膜过滤，用高效液相色谱仪（检测波长220nm)测定滤液中秋水仙素的含量。 2.1.1 提取剂种类对提取效果的影响 分别选用甲醇，乙醇，丙酮，氯仿作提取剂，用索氏提取器提取，结果如表1所示，由表可知乙醇是最好的提取剂。这是因为乙醇具有较强的渗透力，且乙醇与秋水仙素之间可以以氢键结合。 表1 不同溶剂的提取结果 加70%乙醇20mL，水浴回流2次,温度40℃，每次1.5h[9]。 在最佳组合条件下进行萃取，粗提物含秋水仙素0.049%。 方法2：[10] 将新鲜百合球茎一一撕开，洗去泥土，自然晾干后在60℃左右烘至全干，然后打碎过筛备用。称取百合粉120g，经乙醇(80%~90%)浸泡过夜，于75~80℃下回流约10h，浓缩制得浸膏;浸膏用去离子水(50~60℃下)溶解，常温减压过滤除去不溶物;水提取液用石油醚(50ml×3)萃取，去掉蜡质物得到石油醚部分A;水溶液再用乙醚(50ml×3)萃取，乙醚萃取物浓缩得乙醚部分B;而后，水溶液用1%H2SO4调节pH约为2.5，此酸性水溶液用氯仿(40ml×3)萃取，浓缩得酸性×3)萃取浓缩而得碱性氯仿提取物部分D(碱性生物碱部分)。其分离过程见一种富含秋水仙素的黄花（百合类的一种植物）提取物的提取方法，包括以下步骤： 取1g黄花清洗干净，加入8ml50%-95%的乙醇，浸提，在80-85℃下回流提取3-5小时，取出上清液，剩下的残渣同样用上面的方法再次进行回流提取，取出上清液，合并两次上清液，过滤，回收乙醇至无醇味，在70-75℃下干燥18-24小时，得富含秋水仙素的黄花提取物。 2.2.2优点： 适合富含秋水仙素的百合类植物，工艺方法简单，最后提取物中不含有毒的有机溶剂，且易操作，投资小，避免了化学合成工艺中常见的污染问题，环保节能。 2.3 超临界二氧化碳流体萃取法[12] 2.3.1超临界二氧化碳流体萃取百合中的秋水仙素[13] 先将百合干片粉碎过0.75mm筛备用。称取百合粉50g,在30ml氨水中充分浸泡30min,风干后装入500mL的不锈钢萃取釜中,开启主泵,在40℃和18MPa时,以300mL95%乙醇为提携剂将百合静态萃取30min,再开启