有機酸的分析.docVIP

有机酸分析 1概述： 1.1有机酸类成分的分布 有机酸广泛存在于植物界的各个部位，但以有利形势存在的额不多，而多数是与钾、钠、钙等阳离子或生物碱结合成盐而存在。也有结合成酯而存在。 有机酸如果按其羧基的而树木可分为三类，即单羧基酸、二羧基酸哦三羧基酸。另外还有芬酸类，酚酸是指具有酚羟基、一个羧基和一个苯环的额化合物，包括苯甲酰类（C6-C1））） 2.有机酸的分离与定量测定： 食品中有机酸的分离与定量测定可用气象色谱法，离子交换色谱法，高效液相色谱法等。气象色谱法需要对样品衍生，误差较大；而高效液相色谱法操作简便，准确度高，重现性好，可同时定量多种有机酸，因此一伙的广泛的应用。 2.1气相色谱法（GC法） Gas Chromatography 流动相——气体（由载气带着物料气体） 一般用高压气瓶供给（N2、He ) 固定相 固体 ——固体吸附剂 液体——担体 + 固定液 1906年，俄国植物学家茨威特分离植物叶绿体中色素而得名，玻璃管中装CaCO3,石油醚溶解植物叶绿体倒入管内，再用石油醚做淋洗剂，结果，柱子中被分成几个不同颜色的谱带。 气相色谱流程示意图： 从记录仪得到的色谱图 保留时间——从进样到出现组分浓度极大点（色谱峰最高点）的时间tR， 在一定固定相，一定操作条件下，各组分的 t 值不一样。同一组分有同样的 t 值，可用来作定性分析。此外，峰高（h）、峰面积（A）可用作定量分析。 A = h ×半宽度（峰高一半处色谱峰宽度） A=（底×高）／2 A 值 = 积分仪求得总面积的 94％。 计算： ①某一组分的比例=(一组分峰面积／94%）/（ 总峰面积／94％） ② 以标准曲线来计算含量，以含量为横坐标，峰面积为纵坐标。 2. 1层析柱和检测器 2.1.1检测器有多种 ① 热导池检测器（TCD） 在气相色谱中应用最早、最广泛的检测器。灵敏度为100 ppm。 原理：不同组分和载气有不同的导热系数。当通过热导池的气体组成及浓度发生变化时，可引起热敏元件上温度的变化，由此而产生阻值变化，可衡量组分的含量。 ② 氢火焰离子化检测器（FID） 灵敏度比热导池检测器高1000倍，可在室温至300℃范围内使用。 原理：以H2（燃烧气）和空气（助燃气）的火焰为能源，在氢火焰附近装置两个电极（收集极、发射极），两个电极之间外加100~350V电压，当样品组分从色谱柱馏出后，由载气携带，与H2汇合，从喷嘴流出，与空气相遇，经引燃就燃烧。在氢火焰高温能源作用下，样品组分、电离成正、负离子, 在直流电场的作用下，离子向电极移动产生电流，这微小的电流经放大器放大后输入记录器，得出色谱峰信号。氢焰检测器（与单位时间内进入火焰组分的质量成正比，是典型的质量型检测器））对大多数有机物都很灵敏。但对在氢火焰中不电离的或电离很少的物质如N2、NO、CO、CO2、SO2、NH3、H2O、SiCl4、SiF4、HCN等，及无机物不能用这种检测器。 ③ 电子捕获鉴定器（ECD） 是一种具有选择性和灵敏度很高的色谱检测器。放射源—以同位素Ni63和3H为β射线放射源，将载气电离产生正离子和慢速低能量的电子，他们在恒定的电场作用下向极性相反的电极移动形成恒定的电流—基始电流。 当具有电负性的组分进入检测器时，它捕获了电子，变成带负电离子，并与载气产生的正离子结合成中性化合物，被载气带出检测器，结果使基始电流降低产生信号，形成峰值。 这种检测器是对具有电负性的物质（如含有卤素、S、P、N的物质）产生信号，且电负性越强，产生的灵敏度越高，有机氯农药含有卤素 Cl，所以非常适合。也属浓度型检测器。另外还有火焰光度检测器（FPD）测含S、P化合物，在氢火焰中燃烧测其中发光情况。 2.1.2 层析柱（色谱柱） 直径 2 ~ 3 mm，长 1 ~ 2 m，特殊的达十几米，玻璃、尼龙、金属—有机氯在高温下易挂壁，产生催化分解和吸附现象，干扰分析。 气液色谱固定相：担体 + 固定液。 要求：担体 — 化学惰性，与溶质之间不起任何化学作用。买来后往往要自己处理， 经酸洗水洗至中性，干燥后在硅烷化处理。固定液 — 常用OV系列，可在350℃下使用，热稳定性好等，都属硅酮类含甲基、氟等）。要让固定液很好的涂在但体上。 2.2 高效液相色谱法（HPLC)（高速液相色谱法、 高压液相色谱法） 由经典的液相层析法发展来的，始于1906年，比气相色谱分析法早四十多年,但一度停滞，因其流动相靠自身的重力流过色谱柱，效率低，